ют для обнаружения мочеполовых трихомонад. Забор материала проводит врач в процедурном кабинете.

1—2 капли выделений сразу же помещают в каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и исследуют при среднем увеличении микроскопа <Х40, ХЮ) с сухой системой.

Однако препарат на предметном стекле быстро подсыхает и подвижность трихомонад прекращается, что делает их определение, особенно при небольшом числе, невозможным. Эффективнее поэтому готовить препарат по типу «висячей капли» {см. ниже). В получающейся при этом влажной камере благодаря вазелиновой прокладке создается герметичность и замедляется высыхание препарата, подвижность трихомонад может наблюдаться иногда в течение часа.

Трихомонады легко отличить от лейкоцитов и других клеток по характерному движению, наличию жгутиков и ундулирующей мембраны. Более четко они видны при использовании темнополь-ной или фазово-контрастной микроскопии.

Из исследуемого материала в процедурном кабинете готовят также и мазки, которые после подсушивания фиксируют и красят по Романовскому.

Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян: фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: 100 мл воды дистиллированной; 15 капель 1 % раствора карбоната натрия; 4 мл краски Романовского. При этом более четко окрашиваются жгутики, трихомонады становятся хорошо различимы. Ядра приобретают фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазма — голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования — розово-красный.

Просмотр нативных и окрашенных препаратов способствует эффективности лабораторного исследования.

Посев выделений производят, когда трихомонады не обнаруживаются в мазках (при бессимптомном носительстве, после лечения). В качестве питательной среды используют МПБ, содержащий 1 % раствор глюкозы и 5 % раствор инактивированной сыворотки с добавлением 500—1000 ЕД пенициллина и стрептомицина на каждый 1 мл среды. Пробирки после посева помещают в термостат на 24—48 ч, после чего проводят микроскопию.

Лабораторная работа № 3.

Исследование отделяемого мочеполовых путей

на трихомонады методом «висячей капли»

Оборудование: живая культура трихомонад (можно кишечных трихомонад или водных жгутиковых); предметные стекла с лункой; покровные стекла; вазелин (вазелиновое масло); бактериальная петля; пинцет; спиртовка; штатив; банка с I % раствором хлорамина; пинетка с грушей: изотонический раствор хлорида натрия; микроскоп.

Методика работы. 1. Разложить в плоской ванночке предметные стекла с лункой. Поверхность стекла вокруг лунки смазать вазелином.

2. Пробирку с изотоническим раствором слегка подогреть над спиртовкой. Пипеткой набрать изотонический раствор и нанести каплю на покровное стекло.

3. Бактериальной петлей набрать каплю из культуры трихомонад (или исследуемого материала) и внести в. каплю изотонического раствора на покровном стекле.

4. Покровное стекло осторожно захватить пинцетом, перевернуть каплей вниз и наложить на предметное стекло так, чтобы капля исследуемой жидкости оказалась висящей над лункой.

5. Полученную «висячую каплю» на предметном стекле перенести под микроскоп и рассмотреть при малом и среднем увеличении.

9.5. ИССЛЕДОВАНИЕ

ДРУГИХ БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просматривают под микроскопом осадок. С помощью этого метода можно обнаружить вегетативные стадии лямблий.

Спинномозговую жидкость, полученную при пункции, центрифугируют и исследуют осадок. Из осадка готовят нативные мазки, окрашивают их по Романовскому и микроскопируют. В препаратах можно обнаружить патогенных свободноживущих амеб, токсоплазм, трипаносом.

В гное, извлеченном при пункции абсцессов внутренних органов, микроскопически можно обнаружить амеб. Из язв толстого кишечника во время ректороманоскопии получают отделяемое и немедленно микроскопируют — при этом можно выявить подвижные вегетативные стадии (эритрофаги) дизентерийной амебы.

Мокроту исследуют в нативном мазке, а также окрашивают раствором Люголя. В мокроте можно обнаружить пневмоцисты, изредка ротовые амебу и трихомонаду.

Костный мозг исследуют с целью обнаружения лейшмании и некоторых других простейших. Получают костный мозг при пункции грудины, гребня подвздошной или головки большеберцовой костей, готовят мазки на предметных стеклах и микроскопируют после окраски по Романовскому.

Следует учитывать, что за лейшмании иногда ошибочно принимают: I). кровяные пластинки или «осколки» клеток (комочки цитоплазмы, содержащие ядерное вещество), встречающиеся в мазках костного мозга;

2) посторонние микроорганизмы, одноклеточные водоросли и другие, попавшие в мазок во время окраски. В мазке они окрашиваются более интенсивно, чем лейшмании — цитоплазма темно-синего цвета, ядро ярко-малиновое, кине-топласт отсутст