общей сложности примерно такое же количество кала, как и по методу Ка-то (см. 10.3).

Для приготовления большого мазка (Ю. А. Березанцев, Е. Г. Автушенко) 200—300 мг кала (размером с крупную горошину) растирают на стекле размером 6X9 см в 15—20 каплях 50 % водного раствора глицерина. Просматривают под бинокулярным стереоскопическим микроскопом (МБС-1 или МБС-9) в проходящем свете без покровных стекол при увеличении X 12,5, Х4.

В большом мазке хорошо видны окрашенные крупные яйца гельминтов, несколько хуже — прозрачные яйца карликового цепня. Для обнаружения мелких яиц этот метод непригоден. Вместе с тем большой объем исследуемого материала и большое поле зрения при высокой глубине резкости обеспечивает значительную эффективность указанной модификации по сравнению с обычным нативным мазком.

Лабораторная работа № 6. Приготовление нативного мазка кала для исследования на яйца гельминтов

Оборудование: предметные стекла; широкая кювета; лист оконного стекла; деревянные палочки; писчая бумага; ножницы; простой карандаш; 50 % водный раствор глицерина; сосуд с дезинфицирующим раствором; микроскоп.

Методика работы. 1. На кювету положить лист оконного стекла.

2. Нарезать кусочки бумаги размером 3X4 см и написать на них порядковые номера в соответствии с числом исследуемых проб кала.

3. На стекле разложить предметные стекла из расчета 2 стекла на одну пробу кала, под каждую пару стекол подложить номерки.

4. На предметные стекла в двух местах нанести пипеткой по 2 капли 50 % водного раствора глицерина (для его приготовления смешивают равные части глицерина и воды, желательно дистиллированной).

5. Деревянной палочкой взять кусочек кала размером со спичечную головку (30—50 мг) и растереть в капле глицерина на предметном стекле до получения равномерной суспензии. Таким образом на каждом стекле готовят по два нативных мазка (2 препарата), они должны занимать почти всю поверхность стекла, но не сливаться между собой (иначе препарат под микроскопом «поплывет») и не доходить до краев, чтобы не испачкать пальцы лаборанта.

Для приготовления каждого из четырех препаратов палочкой набирают свежий кусочек кала из другой части пробы. Для каждой исследуемой пробы используют только новые палочки.

6. Приготовленные препараты, не накрывая покровными стеклами, исследуют под малым увеличением микроскопа (X Ю, X 8).

7. По окончании исследования стекла погрузить в дезинфицирующий раствор.

10.3. v ТОЛСТЫЙ МАЗОК ПО КАТО

Метод Като более эффективен, чем изучение нативного мазка, но также требует сочетания с методами обогащения. Выявля

f 1

Рис. 10.1. Методика приготовления толстого мазка кала с целлофаном по Като.

ются яйца всех видов гельминтов, однако с целью обнаружения яиц карликового цепня (яйца прозрачные) или описторха (мелкие яйца) лаборант должен быть особо внимательным, чтобы их не пропустить.

Метод основан на обнаружении яиц гельминтов в толстом мазке кала, просветленном глицерином и подкрашенном малахитовым зеленым.

Необходимый для приготовления толстого мазка гидрофильный целлофан нарезают пластинками размером 20 X 40 мм и погружают в смесь Като: 6 мл 3 % водного раствора малахитового зеленого; 500 мл глицерина; 500 мл 6 % раствора фенола. 3—5 мл смеси хватает на 100 пластинок, которые готовы к использованию через сутки и могут храниться в этой же смеси в хорошо закрытой посуде при комнатной температуре в течение б мес.

При отсутствии малахитового зеленого (рекомендуется для уменьшения утомляемости глаз лаборанта) и фенола (дезинфицирующее средство) можно пользоваться только 50 % водным раствором глицерина, эффективность исследования не снижается.

Лабораторная работа № 7. Приготовление толстого мазка кала с целлофановой пластинкой по Като

Оборудование: широкая кювета; лист оконного стекла; предметные стекла; полоски целлофана, обработанные по Като; крупные резиновые пробки; пинцет; деревянные палочки; бумага; ножницы; карандаш простой; микроскоп.

Методика работы. 1. На листе оконного стекла разложить предметные стекла и под них поместить номерки.

2. Деревянной палочкой набрать кусочек кала размером с горошину (100 мг) и поместить на предметное стекло в центральной его части.

3. Из банки достать пинцетом обработанную по Като пластинку целлофана и наложить на пробу кала на предметном стекле.

4. Резиновой пробкой осторожно придавить целлофан так, чтобы кал равномерно распределился под ним, не вытекая из края пластинки (рис. 10.1).

5. Препарат оставить для просветления на 60 мин (в жаркую погоду — на 30—40 мин). Затем микроскопировать.

Примечание: а) причиной непрозрачности препарата могут быть толстый слой фекалий, плохая обработка пластинки в смеси Като, недостаточный срок выдержки препарата под целлофаном; б) длительное просветление глицерином и чрезмерное высыхание препарата также затрудняют обнаружение яиц.

10.4. • МЕТОД ФЮЛЛЕБОРНА

Этот метод — метод обогащения — основан на всплы-вании яиц гельминтов в насыщенном растворе хлорида натрия, имеющем высокую отно