едметное стекло и пипеткой добавлять раствор нитрата натрия, пока нижняя поверхность предметного стекла не соприкоснется со слоем жидкости. После этого стекло сдвинуть так, чтобы оно полностью закрывало банку. Под стеклом не должно быть пузырьков (см. рис. 10.2, г).

6. Оставить для отстаивания на 20—30 мин, желательно в вытяжном шкафу.

7. По окончании отстаивания предметное стекло осторожно, но быстро снять, переворачивая влажной поверхностью кверху. Во влажном слое содержатся яйца гельминтов, всплывшие в поверхностную пленку.

8. В препарат для предупреждения высыхания добавляют пипеткой 2—3 капли водного раствора глицерина, микроскопируют.

Примечание: во избежание загрязнения столика микроскопа влажным стеклом ширина его должна быть больше, чем диаметр отверстия банки. Это способствует н более полному снятию янц нз поверхностной пленки.

10.6. МЕТОД П. П. ГОРЯЧЕВА

Метод Горячева основан на принципе осаждения яиц. Мазок в этом случае получается светлый, без грубой примеси, что облегчает обнаружение мелких яиц трематод.

В несколько модифицированном виде исследование проводится следующим образом: в пробирку наливают 3—4 мл насыщенного раствора хлорида натрия, осторожно сверху наслаивают размешанные в 3—4 мл воды фекалии так, чтобы образовалось два четко разграниченных слоя. Пробирки ставят в штатив на 15—20 ч. За это время яйца трематод оседают на дно пробирки. Затем жидкость осторожно отсасывают или сливают. Осадок переносят пипеткой на предметное стекло и исследуют под микроскопом.

Метод Горячева был предложен для обнаружения яиц опи-сторха и оказался эффективнее, чем исследование нативного мазка и метода Фюллеборна. В настоящее время для диагностики описторхоза (клонорхоза) рекомендуют методы Като и Ка-лантарян, как достаточно эффективные и технически более простые.

10.7. МЕТОД ЗАКРУЧИВАНИЯ ПО Е. С. ШУЛЬМАНУ <

Метод предложен для обнаружения в кале личинок гельминтов, в первую очередь стронгилоида. С целью обнаружения личинок исследуют только свежевыделенные фекалии, 2—3 г которых переносят палочкой в стеклянную банку. Сюда же добавляют 5-кратное количество воды и быстро размешивают палочкой, не касаясь стенок банки. Через 20—30 с после начала размешивания палочку быстро вынимают, образовавшуюся на ее конце каплю жидкости переносят на предметное стекло и микроскопи-руют.

10.8. МЕТОД БЕРМАНА .

Метод Бермана основан на способности личинок гельминтов мигрировать по направлению к теплу и служит для их выявления в фекалиях, в первую очередь при подозрении на стронгилоидоз.

Лабораторная работа № 10.

Обнаружение личинок гельминтов в фекалиях по Берману

Оборудование; металлический штатив; стеклянные воронки; мелкоячеистая металлическая сетка к воронкам; резиновые трубки и зажимы к ним; марля или широкие бинты; центрифужные пробирки; центрифуга; микроскоп.

Методика работы. 1. На узкий конец стеклянной воронки надеть резиновую трубку с зажимом. Воронку укрепить в штативе (рис. 10.3).

2. В воронку поместить металлическую сетку и заполнить воронку подогретой до 40—45 °С водой так, чтобы нижняя часть сетки была погружена в воду.

3. На сетку положить 2 слоя марли и на нее 5—10 г кала. Личинки из фекалий активно мигрируют в теплую воду и скапливаются в нижней части резиновой трубки, надетой на воронку.

4. Через 4 ч зажим на трубке открыть и опустить жидкость в две центрифужные пробирки.

5. После центрифугирования в течение 2—3 мин надосадоч-ную жидкость быстро слить, а осадок перенести на предметное

стекло и исследовать под микроскопом.

6. Марлю с фекалиями поместить в бак с дезинфицирующим раствором, воронки и сетки обезвредить кипячением.

Примечание: для повышения эффективности метода рекомендуют (Шуль-ман и Москаленко) на сетку помещать 20 г фекалий, учитывая, что чем больше взято фекалий, тем вероятность обнаружения личинок выше, а также жидкость из трубки спускать через 2 ч отстаивания.

10.9. УПРОЩЕННЫЕ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ

ЛИЧИНОК СТРОНГИЛОИДА В ФЕКАЛИЯХ

ПРИ МАССОВЫХ ОБСЛЕДОВАНИЯХ

Для ускорения и облегчения массовых обследований в интенсивных очагах строигилоидоза допускается применение упрощенных методов выявления личинок.

Метод Брумпта в модификации Шульмана. 5 г фекалий помещают в стеклянный или парафинированный стакан и заливают 10—15 мл обычной воды комнатной температуры. Через 20 мин воду сливают в чашку Петри и исследуют под микроскопом.

Метод Исупова и Прохорова. В стеклянные мазевые банки помещают металлическую сетку. На нее переносят 3—4 г фекалий, которые покрывают водой, подогретой до 40 °С. Через 30 мин сетку с фекалиями удаляют, а жидкость центрифугируют или отстаивают на 10—15 мин и исследуют осадок.

10.10. J ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕКАЛИЙ

НА ШИСТОСОМЫ

При обработке фекалий яйца шистосом обнаруживают в осадке после отстаивания или центрифугирования.

Метод осаждения. В коническом стакане вместимостью 200 мл смешивают 1 г фекалий с 1—2 мл растворителя (смесь 50 % водного раствора глицерина и изотонического раствора хлорида натрия в соотношении