ходит фиксация и сколексы становятся плоскими, хорошо бывают видны присоски, а также крючья на сколексе свиного цепня. Если фиксацию в этаноле производить без прессования, то головки сжимаются, приобретают округлую форму и после дальнейшей обработки не расправляются. На таких препаратах плохо видны детали строения.

По этой же методике готовят препараты из трихинеллезного мяса. Кусочки мышечной ткани, зараженной личинками трихинелл, препаровальными иглами расщепляют вдоль волокон на мелкие частицы. Кусочки мышц укладывают на предметное стекло, закрывают другим предметным стеклом и слегка сдавливают, а затем оба стекла связывают ниткой и погружают в 70 % этанол на 12—24 ч. Если фиксацию мышц провести без прессования между стеклами, ткань в этаноле сжимается и в препаратах будут плохо заметны личинки трихинелл.

По окончании фиксации стекла со сколексами и кусочками трихинеллезного мяса извлекают из этанола, развязывают нитки и осторожно препаровальной иглой снимают спрессованные сколексы и кусочки мышц в 70 % этанол.

Обезвоживание производят в спиртах восходящей крепости, помещая материал в 80 %, а затем в 96 % и еще раз в 96 % этанол, выдерживая в каждом из них по 5 мин.

Перекладывание из бюкса в бюкс надо производить осторожно и брать материал препаровальной иглой или маленьким пинцетом за самый край кусочка ткани, а сколексы захватывать за свободный конец шейки.

После обезвоживания в этаноле препараты последовательно проводят через карбол-ксилол, ксилол и еще раз через ксилол (состав карбол-ксилол а: 1 часть фенола и 3 части ксилола). В указанных жидкостях препараты должны находиться не более 1 мин в каждой.

Затем препараты переносят на предметное стекло в нанесенную на него каплю бальзама и накрывают покровным стеклом. Закрывать стеклом следует осторожно, подводя его к капле бальзама под углом во избежание образования пузырьков воздуха. Готовый препарат высыхает в течение 10—15 дней.

10.20. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПОСТОЯННЫХ

ОКРАШЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ГЕЛЬМИНТОВ

Препараты без фиксации. Препараты готовят из гермафродит-ных члеников крупных цестод.

Предварительно готовят лактат кармина (0,1—0,3 г кармина растворяют в 100 мл 50 % молочной кислоты).

Часть стробилы гельминта, состоящую из гермафродитных члеников, выдерживают в воде в течение 1—3 дней, затем помещают в лактат кармина на 4—б—12 ч. Срок нахождения в красителе зависит от величины объекта.

После окрашивания сосуд с помещенной туда стробилой завязывают марлей и переносят под струю водопроводной воды. Марля предохранит препарат от вымывания и его потери. Промывают не менее 1 ч. По окончании промывания стробилу разрезают ножницами на отдельные кусочки по 2—3 членика в каждом, раскладывают на предметные стекла и оставляют для высыхания на 6-— 12 ч. Сухие членики заливают бальзамом и накрывают покровным стеклом.

Препараты с предварительной фиксацией. Готовят из мелких трематод или цестод, а также из герматофродитных члеников крупных цестод.

Предварительно готовят краситель — хлорид кармина. 5 г кармина растирают в ступке с 5 мл хлороводородной кислоты и 5 мл дистиллированной воды. Тщательно растертую смесь оставляют на 1 ч. Затем из ступки кармин переносят во флакон и добавляют 200 мл 90 % этанола, смесь помещают на водяную баню до полного растворения кармина, примерно на 1 — 1,5 ч. За это время часть этанола испарится, поэтому по окончании растворения кармина добавляют во флакон этанол той же крепости до первоначального объема. Краситель сохраняют в хорошо закупоренном сосуде длительное время.

Свежевыделенные трематоды или цестоды выдерживают в воде: мекие объекты — 3—4 ч, крупные — б—12 ч. Затем гельминты раскладывают на предметном стекле, накрывают его другим и перевязывают стекла ниткой.

Препараты переносят в 70 % этанол на 1—2 ч (мелкие объекты) или 6—12 ч (крупные объекты).

По окончании фиксации гельминты осторожно снимают со стекол и погружают в краситель на срок от 30 мин до 1 ч в зависимости от величины объекта. Гельминты окрашиваются в интенсивно красный цвет. Для удаления излишков краски и выявления деталей строения гельминты переносят в смесь этанола и хлороводородной кислоты (на 100 мл 80 % этанола добавляют 2—3 капли кислоты) на 5—10 мин. Когда семенники, яичники и другие детали строения станут хорошо заметными, препараты переносят в чистый 80 % этанол, затем в 96 % этанол, дважды меняя порции. В бюксах с этанолом гельминты должны находиться не менее 5—7 мин. После этого объекты проводят через карбол-ксилол и дважды — через ксилол.

В бюксах с ксилолом объекты должны находиться не более 1—2 мин. Перенесенный из этанола в бюкс с карбол-ксилолом гельминт плавает на поверхности. Поэтому препаровальной иглой или пинцетом его нужно погрузить на дно. После проведения гельминта через ксилол его переносят на предметное стекло в 1—2 капли бальзама. Хорошо расправив препарат, сверху наносят еще 1—2 капли бальзама и осторожно накрывают покровным стеклом.

10.21. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПОСТОЯННЫХ ПРЕПАРАТОВ, ЗАКЛЮЧЕННЫХ В ГЛИЦЕР