увлажняют и просматривают под микроскопом. Погибшие яйца не изменяются, а в живых наблюдается развитие личинок (рис. 11.2 на цв. вкл., см. рис. 6.4 и 6.14).

Исследование зрелых яиц. Основным признаком зрелого яйца является наличие личинки. Поэтому определение жизнеспособности зрелого яйца в основном сводится к оценке состояния личинки.

Подвижность личинки в зрелом яйце аскариды, власоглава или острицы можно заметить, если препаровальной иглой слегка надавить на покровное стекло или немного подогреть препарат до температуры не выше 37 °С (над электролампочкой, спиртовкой, в термостате или на нагревательном столике микроскопа). Яйца остриц можно поместить в искусственный желудочный сок при температуре 37 °С на 4 ч, что способствует вылуплению личинок.

Живых личинок определяют также по их отношению к окрашиванию. Для этого в препарат с исследуемыми яйцами добавляют водный раствор (1:10 000) краски бриллиантового крези-лового синего. При легком надавливании на покровное стекло погибшие личинки не выходят из яйца и окрашиваются в течение 2 ч в синеватый цвет. Живые личинки, наоборот, выходят из яйца, но за тот же период не окрашиваются.

При добавлении к яйцам остриц 1 % раствора метиленового синего окрашиваются лишь погибшие зародыши.

Инвазионность (зрелость) личинок аскарид можно определить по наличию чехлика на головном конце, что хорошо видно после выхода личинки из яйца.

11.7. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЯИЦ ЦЕСТОД

Исследование онкосфер тениид. Онкосферы бычьего или свиного цепней в часовом стекле заливают искусственным дуоденальным соком (панкреатина 0,5 г, гидрокарбоната натрия 0,09 г, дистиллированной воды 5 мл) и помещают в термостат при температуре 37 °С на 4 ч. Живые зародыши через указанный срок в отличие от погибших освобождаются от оболочек. Они имеют удлиненную форму, слегка блестят и хорошо контурируются на более тусклом фоне препарата.

Погибшие зародыши тусклые, шарообразные, быстро распадаются и нередко почти целиком перевариваются в соке. При добавлении сафранина (1:8000) они в течение нескольких минут окрашиваются в ярко-красный или розовый цвет.

По методике А. Г. Камаловой онкосферы тениид помещают в 1 % раствор сульфида натрия и выдерживают при температуре 37 °С в течение 30 мин. Зрелые и живые зародыши освобождаются от оболочек, но не изменяются в течение суток. Незрелые и погибшие онкосферы чернеют, сморщиваются или набухают и в сроки от 10 мин до 2 ч растворяются, крючья в таких онкосферах располагаются в беспорядке. Рекомендуется обработку онкосфер сочетать с последующей окраской сафранином, что повышает достоверность.

Исследование яиц карликового цепня. В живой онкосфере можно видеть 3 пары крючьев, лежащих параллельно друг другу. Иногда крайние пары образуют небольшой угол по отношению к средней. В погибшем зародыше крючья расположены в беспорядке, под различными углами друг к другу.

По методике А. И. Гущиной яйца карликового цепня, находящиеся в воде, охлаждают 5—10 мин при низкой температуре (от —5 до —10 °С), а затем препарат быстро переносят на нагревательный столик микроскопа с температурой 37 °С. При этом в живых яйцах наблюдается активное движение зародыша.

По методике В. П. Подъяпольской и Л. И. Г о-родиловой яйца окрашиваются в течение часа водным раствором бриллиантового крезилового синего (1:8000), при этом у мертвых яиц ярко окрашенная голубая онкосфера хорошо выделяется на фоне бледно окрашенного или бесцветного яйца. Водный раствор сафранина (1:8000) окрашивает погибшие зародыши в течение 2 ч в интенсивно розовый цвет.

Живые яйца или не окрашиваются или приобретают равномерную бледную окраску.

11.8. ЛИЧИНКИ В МЯСЕ

Определение жизнеспособности личинок гельминтов, обнаруженных в мясе или рыбе (см. 11.9 и 11.10), необходимо в случаях, когда приходится решать вопрос о степени их опасности для заражения человека или эффективности обезвреживания загрязненного продукта.

При обнаружении в мясе финн (цистицерков) бычьего или свиного цепней их осторожно извлекают, помещают в подогретую до 40 °С смесь из равных частей изотонического раствора хлорида натрия и желчи скота. Затем переносят в термостат при температуре 37 °С. В течение 10 мин — 1 ч головки начинают выворачиваться, причем длительно сохраняется их легкая подвижность. Погибшие финны при наблюдении в течение 2 ч не выворачиваются.

С целью определения жизнеспособности личинок трихинелл кусочек зараженного мяса измельчают ножницами, заливают в стакане 5—10-кратным количеством искусственного желудочного сока. Затем добавляют по каплям 1—2 % раствор метилено-вого синего до интенсивного окрашивания и ставят стакан в термостат при температуре 37 °С. Через 3—4 ч стакан извлекают, осадок несколько раз промывают водой путем центрифугирования до обесцвечивания воды. Осадок микроскопируют. Погибшие трихинеллы в отличие от живых окрашиваются в синий цвет.

11.9. ИССЛЕДОВАНИЕ РЫБЫ НА ЗАРАЖЕННОСТЬ ЛИЧИНКАМИ ОПИСТОРХА

Методика исследования рыбы. С целью обнаружения личино