к (метацеркариев) описторха исследуют рыб семейства карповых.

Компрессионным методом исследуют как минимум по 5 проб мышц, отобранных с обеих сторон тела рыбы (каждая проба с площади 2 см2 на глубине 2—3 мм). При исследовании вяленой, соленой, копченой рыбы ее предварительно сутки вымачивают в воде. Мышцы измельчают и по 1 — 1,5 г сдавливают в компрессориуме или между двумя стеклами размером 6X12 см. Исследуют при увеличении Х16.

Метод переваривания эффективнее предыдущего в 1,5 раза. Отделяют всю поверхностную (до 0,5 см) мышечную ткань исследуемой рыбы, тщательно измельчают. Затем заливают в соотношении 1:10 искусственным желудочным соком (11 мл концентрированной хлороводородной кислоты, 7 г пепсина, 9 г хлорида натрия на 1 л дистиллированной воды). Помещают в термостат на 3 ч при температуре 37 °С. После выдержки в термостате смесь фильтруют через металлическую сетку с размером ячеек 1X1 мм. Через 15—20 мин верхний слой жидкости сливают, осадок переносят в чашку Петри и исследуют.

Определение жизнеспособности личинок. По морфологии: выделенные метацеркарии переносят в каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, осторожно накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Признаками гибели личинок служат только грубые изменения структуры, явное нарушение целостности оболочек цисты, зернистый распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря.

По подвижности: метацеркарий переносят на предметное стекло (или в часовое стекло) и наслаивают несколько капель человеческой желчи или 0,5 % раствора трипсина на изотоническом растворе хлорида натрия. Уже через 10—15 с личинки выходят из цист и проявляют активное движение. Отсутствие в течение 10—15 мин всякой двигательной реакции и пожелтение метацеркариев говорят об их гибели.

11.10. ИССЛЕДОВАНИЕ РЫБЫ НА ЗАРАЖЕННОСТЬ ЛИЧИНКАМИ ДИФИЛЛОБОТРИИД

Методика исследования рыбы. На зараженность личинками (плероцеркоидами) дифиллоботриид, опасных для здоровья человека, исследуют свежевыловленных щук, налимов, окуней, ершей, лососевых, хариусовых, корюшковых рыб.

Ножницами разрезают брюшко по средней линии, начиная от анального отверстия. Затем вырезают левую брюшную стенку. Осматривают полость тела и внутренние органы. Обнаруженные плероцеркоиды переносят в чашку Петри. Затем извлекают внутренние органы и исследуют компрессионным способом с помощью микроскопа (лучше МБС). Далее снимают кожу, исследуют компрессионно полностью все мышцы, разрезая их в косом направлении или на пластинки толщиной не более 3—5 мм.

Диагностические признаки плероцеркоидов. В теплой воде плероцеркоиды активно сокращаются и вытягиваются, складки на теле при этом сохраняются, становится виден сколекс, его наличие в виде удлиненного заостренного на конце конуса помогает отличить личинку от других цестод или их фрагментов.

Живые плероцеркоиды помещают на предметное стекло в каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. В воде плероцеркоиды широкого лентеца выживают около суток.

Плероцеркоиды чаечного лентеца часто располагаются в капсулах длиной до 100 мм, которые имеют кремовый или желтоватый цвет. В воде при расслаблении личинок складки на теле исчезают. В воде выживают не более 5—7 мин.

Плероцеркоиды других лентецов, не опасных для человека, чаще встречаются у лососевых и корюшковых рыб, в мелких капсулах на пищеводе и желудке. В воде выживают не более 5—7 мин.

Определение жизнеспособности личинок. Жизнеспособность плероцеркоидов определяют по внешним признакам и путем окрашивания.

Плероцеркоиды помещают в теплый изотонический раствор хлорида натрия или желудочный сок и осторожно раздражают препаровальной иглой. Даже слабые движения характеризуют живую личинку. Изменение цвета, отслоение кутикулы и другие изменения тела указывают на их гибель.

Можно окрасить живых плероцеркоидов водным раствором нейтральрота в разведении 1:20 000—1:50 000 в течение 30— 40 мин. Затем рыбу с окрашенными плероцеркоидами обеззараживают одним из рекомендуемых способов и проверяют через определенное время жизнеспособность личинок. Их обесцвечивание является одним из показателей гибели.

Вопросы для повторения

I. Чем определяется объем пробы, отбираемой для санитарно-гельминтологи-ческого исследования? 2. Яйца каких видов гельминтов могут быть обнаружены в воде? 3. Яйца и личинки каких видов гельминтов могут быть обнаружены в почве? 4. В очагах каких гельминтозов чаще всего прибегают к исследованию смывов с предметов и пыли? 5. Как вы оцениваете роль лаборанта в предупреждении заражения людей описторхозом и дифиллоботриозом?

Глава 12. МЕТОДЫ СБОРА, УЧЕТА

И ИЗУЧЕНИЯ ЧЛЕНИСТОНОГИХ

Сбор членистоногих: опасных для здоровья человека, проводят на определенной территории с целью изучения видового состава, сезонной численности, мест выплода и т. д. Полученные данные являются основой оценки эпидемиологической роли переносчиков, прогнозирования ситуации и организации борьбы с ними.

12.1. КЛЕЩИ