медицинский каталог




Эмбриональные стволовые клетки

Автор Репин В.С., Ржанинова А.А., Шаменков Д.А.

и STAT4-/- и STAT6-/- развивали летальные дефекты созревания тимоцитов. Зародыши STAT3-/- погибали внутриутробно на стадии раннего органогенеза. Зародыши STAT5a-/- имели внутриутробные аномалии развития молочной железы (Akira S., 1999). У зародышей SF-1-/- нарушалась закладка надпочечников и половых зачатков. У зародышей Wt-1-/- нарушалась закладка и развитие почек. Этим же способом, показано что выключение Нох-1 гена частично блокирует гематопоэз в зародышах. Выключение Нох-7, Нох-8 генов вызывает аномалии развития миоцитов.

После имплантации, клетки эмбриобласта дифференцируются в экстраэмбриональную энтодерму и эмбриональную эктодерму. Эмбриологи искали способы моделирования этих событий in vitro. Если из среды убрать фидер и LIF, пролиферация клонов приостанавливалась. ЭСК формировали агрегаты (эмбриоидные тельца). В части агрегатов шла дифференцировка клеток, которая в обратном порядке по отношению к зародышу включала маркерные гены трех зародышевых листков. Наружний слой маркировал экстраэмбриональную эндодерму геном GATA-4, тогда как внутренний слой - в эктодерму маркерным геном nodal (Xiong J.W., Battaglino R., Leahy A. et al., 1999). Одновременно в клеточных агрегатах убывала экспрессия гена Oct-4. Несколько лабораторий научились эффективно контролировать дифференцировку клеточных агрегатов (эмбриоидных телец) после экспрессии генов трех зародышевых листков (Schamblott M.J., Axelman J.,Littlefield J.W., et al., 2001). Задача заключалась в направленном получении клеток одного зародышевого листка из эмбриоидных телец. С этой целью научились включать гены гаструляции и органогенеза в эмбриоидных тельцах в более медленном темпе (Leahy A., Xiong J.W., Kuhnert F., J. Exp. Zool., 1999). Включение генов органогенеза автоматически вело к утрате туморигенности постмитотическими клетками эмбриоидных агрегатов. Более того, трансплантационная выживаемость и активная колонизация такой плюрипотентной ткани в организме реципиента была выше, по спавнению с исходными ЭСК. Пересадки тотипотентной зародышевой ткани на стадии экспрессии первых генов зародышевых листков вытеснят в недалеком будущем пересадки клеточных линий стволовых клеток из-за более высокой эффективности колонизации, приживления, плюрипотентности ростков. По мнению Герхардта, плюрипотентная зародышевая ткань сохраняла синергизм взаимодействия клонов, который необходим для выращивания полноценного трансплантата.Такая плюрипотентная ткань незаменима для моделирования и изучения процессов гаструляции, а также взаимодействия мезенхимы с гомогенной эктодермой или мезодермой in vitro. Напомним, что потенции линий ЭСК человека в генерации дифференцированных клеток пока не стоит преувеличивать. Например, только 8 % эмбриоидных телец удается in vitro превратить в островки сокращающихся кардиомиоцитов (у ЭСК мышей эта способность к моно-дифференцировке – на порядок выше) (Kehat I., Kenyagin-Karsenti D., Snir M. Et al., 2001). При этом образующиеся в культуре кардиомиоцитоы имеют незрелую ультраструктцру саркомеров и дисков. Между тем многие биотехнологические компании, владеющие первыми линиями ЭСК человека, уже делают широковещстельные заявления о том, что линии ЭСК человека должны стать единственным мостом в будущее ( игнорируя неограниченные геномные возможности природных фетальных тканей).

С помощью ЭСК апо-Е3-/- удалось вывести линию мышей с высокой предрасположенностью к атерогенному атероскерозу. У этих животных в постнатальном периоде развивалась гиперхолестеринемия и исчезала природная резистентность к стенозирующим бляшкам. Эти мыши сейчас широко используются для тестирования новых гиполипидемических и антиатерогенных препаратов.

Как известно, первичные сигналы, формирующие 3D-оси зародыша после имплантации, возникают на стыке экстраэмбриональной энтодермы, висцеральной энтодермы и эмбриональной эктодермы. Лишь часть этой программы фрагментарно воспроизводится в культуре эмбриоидных телец. (Knezevic V., Mackem S.,2001).

Если ЭСК выделять из эмбриобласта бластоцисты, первыми возникали эмбриоидные агрегаты с маркерами эндодермы в виде фрагментов желточного мешка. Примитивная висцеральная энтодерма образуется из мигрирующих клеток эмбриобласта. Позднее многие клетки эпибласта мигрируют в париетальную энтодерму и в клетки желточного мешка. Далее из части желточной эндодермы шло формирование первичных ангиобластов и капиллярогенез. Поэтому примесь эндодермы и эндотелиальных клеток удаляли перед повторным пипетированием клонов для получения тотипотентных ЭСК. Попытки выделить ЭСК из трофобласта закончились неудачей (возможно из-за наличия в сыворотке бактериальных эндотоксинов). Однако популяцию гигантских клеток трофобласта получают путем трансфекции бластомеров мыши геном Hand1 и его сверхэкспрессии в клетках, которые дифференцируются в трофэктодерму (Fan Y., Melhem M., Chaillet R.,1999). Даже следовые концентрации эндотксина в среде культивирования вызывали массовую гибель незрелых стволовых клеток. Впрочем получить клетки трофобласт

страница 21
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66

Скачать книгу "Эмбриональные стволовые клетки" (12.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(18.08.2019)