медицинский каталог




Эмбриональные стволовые клетки

Автор Репин В.С., Ржанинова А.А., Шаменков Д.А.

рных клеток островков Лангерганса был похожим на фенотип природных эндокринных клеток. Лабораторно полученные бета-клетки с пока низкой эффективностью нормализовали гипергликемию у животных с экспериментальным диабетом (Soria B., Roche E., Berna G., et al, 2000).. Содержание проинсулина в этих клетках было меньше, чем в природных.

Рис 1-13. Получение разных линий нейронов из общего пула нестин+ субпопуляций НСК in vitro

Впервые были найдены лабораторные способы наработки стволовых клеток мозга и показано, как химические сигналы направляли дифференцировку клеток в клоне. . Хотя уровень инсулина в полученных лабораторных бета-клетках был ниже, чем в природных островках, этот первый решенный генетический ребус помог найти software самого включения гена инсулина. Решить проблему количественной экспресии будет проще.

Проблема происхождения эндотелиальных клеток была долгое время неразрешимым вопросом клеточной эмбриологии, исследовавшей появление новых линий специализированных клеток in situ. Исследования на ЭСК мышей сумели добавить новую страницу знаний. Хотя было известно, что первичные эндотелиоциты возникают из мезодермы, не удалось найти маркерных антител для самых ранних популяций. (Nishikawa S., Hirashima M., Nishikawa S. et al., 2001). Такие общеизвестные маркеры “раннего” фенотипа эндотелиальных клеток как Flk –рецептор и E-cadherin оказались непригодными, поскольку метили все клетки мезодермы. Более селективные маркеры выявили с помощью клеточного сортера, который помог изолировать субпопуляцию VEGEFR2+ Flk- E-cadh – клеток. В специальных средах эти предшественники дифференцировались в эндотелиоциты. Показательно, что фидер ОР9 из стромальных клеток поддерживал клоногенный рост эндотелиальных стволовых клеток. Введение цветного белка в стволовые клетки позволило визуализовать динамику созревания клонов. Таким образом, в лаборатории был не только прослежен по этапам путь созревания ЭСК в стволовую эндотелиальную клетку, но и налажено производство этих уникальных клеток со скоростью 10 (7) клеток в минуту. Хорошо известно, что стволовые эндотелиальные клетки широко сейчас используются в опытах на животных для экспериментальной неоваскуляризации сердца, почек, других паренхиматозных органов. Первоначально факторы ангиогенеза (рекомбинантные VEGF, FGF, HGF) рассматривались в качестве агентов No1 реваскуляризации ишемизированного сердца, почек, скелетной мышцы (Freedman S.B., Isner J.M., 2002; Toyoda M., Takayama H., Horiguchi N. Et al., 2001). Однако в последние годы все больший акцент делается на экспериментальную пересадку стволовых / прогениторных эндотелиальных предшественников с целью реорганизации микроциркуляции и улучшения кровонабжения в ишемизированной ткани (терапевтический васкулогенез) (Mirobara T., 2001). Стволовые клетки эндотелия также, по-видимому, характеризуются множественным фенотипом. Так, предшественники эндотелиальных клеток, идентифицированные в постнатальном колстном мозге человека, имели иммунофенотип, отличный от фенотипа стволовых клеток, получаемых через ЭСК (Reyes M/, Dudek A., Jahagridar A. et al., 2002).

Хотя на рынке биоуслуг предлагается более 100 линий ЭСК, многие из них при трансплантации в бластоцисту не химеризуют зародыш, т.е. малоэффективны для изучения закономерностей постимплантационного эмбриогенеза. (O’Shea K.S., 1999). Однако у некоторых тщательно отобранных линий ТК и ЭСК удается вызвать экспрессию маркерных генов эпибласта, эстраэмбриональной энтодермы или первичной полоски. Эти селектированные линии ЭСК могут принести максимальную пользу в получении неограниченных клеточных масс эпибласта – главного биосырья банков клеток человека. Получение клеток эпибласта в обход оплодотворения и беременности будет второй революцией в биологии (после получения линий ЭСК человека), которая создаст фундамент новой медицины, использующей закономерности эмбриогенеза и клеточной регенерации для защиты от наиболее распространенных фатальных заболеваний человека.

Получение специализированных клеток с варьирующим фенотипом идет в двух направлениях: а) через спонтанно формирующиеся эмбриоидные тельца (плюрипотентную зародышевую ткань) б) через культуру одиночных клеток ЭСК путем стимуляции начальной дифференцировки в трансфицированных клетках . Например, стимуляцию кардиогенеза вызывают лишней дозой гена Nkx-5-2, эритропоэза – лишней дозой HoxB4, нейрогенеза – лишней дозой Neuro D, миогенеза – лишней дозой Myo D гена . Хотя получаемые по этой прописи кардиомиоциты имеют полный фенотип, набор рецепторов и электровозбудимые ионные каналы, их выживаемость in vitro ограничена по сравнению с кардиомиоцитами, получаемыми из эмбриоидных телец. Различия двух клеточных популяций кардиомиоцитов проявляются не на уровне элементарного биохимического фенотипа, а на уровне поведения клеток, которое определяется согласованной работой всех биохимических машин и soft- программ кардиомиоцитов.

10. ЭСК: законодательство и биоэтика

После создания мет

страница 28
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66

Скачать книгу "Эмбриональные стволовые клетки" (12.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(19.02.2019)