медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ую рабочую площадь мембранного фильтра.

Устанавливают, сколько полей зрения помещается на рабочей площади мембранного фильтра, деля Р на р, где Р —рабочая площадь мембранного фильтра, ар — площадь поля зрения.

Так как Р и р—площади круга, то эти величины иа-ходят по формуле яй2. Диаметр поля зрения измеряют ? объектным микрометром, а. диаметр рабочей площади фильтра—с помощью миллиметровой бумаги.

Полученное число клеток на фильтре делят на объем пропущенной через фильтр жидкости и получают число зародышей в 1 мл воды или другой жидкости.

4 УЧЕТ ЧИСЛЕННОСТИ БАКТЕРИЯ В ВОЗДУХЕ

При определении численности микроорганизмов в

воздухе В пробирку с 10 мл стерильной водопроводной воды пропускают определенный объем воздуха. Для этого пробирка с водой закрывается стерильной пробкой с двумя стеклянными трубками. Одна трубка, сообщающаяся с воздухом, опускается в воду до дна пробирки, а другая трубка, соединенная с аспиратором, оканчивается сразу под пробкой. По количеству воды (в л), выпущенной из аспиратора, устанавливают объем воздуха, прошедшего через стерильную воду в пробирке. При прохождении воздуха- через воду бактерии остаются в воде. Их численность затем определяют так же, как и в воде, после приготовления соответствующих разведений методом питательных пластин, или последующей фильтрацией через мембранные фильтры, подсчитав число зародышей на чашке или на мембранных, фильтрах. Зная объем воздуха, прошедшего через воду, делают йотом пересчет " численности бактерий на 1 м8 воздуха.

Для определении численности бактерий в воздухе можно использовать более простой, но менее точный метод Коха {осаждением зародышей микроорганизмов на плотных питательных средах). Суть его, сводится к следующему. Стерильные чашки Петри с питательной средой (МПА, МПЖ или кусок вареной картофелины)

76

открывают в исследуемом помещении (ИЛИ на исследуемой площади) на 5 мин. Частицы пыли с бактериями в силу тяжести оседают на поверхность плотной.среды.

После 48-чаеовой инкубации при 28—30°С осевшие, бактерии образуют колонии на среде, и их можно подсчитать. Учитывая, что некоторые микроорганизмы раз-.-виваются медленно, окончательный подсчет проводят на пятые сутки.

По приблизительному расчету, на площадь В 100см8 В течение 5 мин осаждается примерно столько бактериальных зародышей, сколько находится в 10 л воздуха (0,01 м5). Зная площадь чашки Петри, по этим данным можно подсчитать число микробных клеток в 1 м3 воздуха. Для этого число колоний, выросших в чашке Петри, относят к общей площади чашки, затем пересчитывают, сколько таких колоний поместилось бы на 100 см1 и переводят на 1 м3 воздуха.

Пример. В чашке Петри диаметром 10 см выросло 45 колоний. Площадь чашки 3,14-5*-78,5 оА Чтобы подсчитать число клеток 10 л, или 0,01 и» воздуха), сы'.Х):

на 100 смг (рг пропорцию (78,5 си8:45-100

100.45

Таким образом, в 0,01 и3 воздуха находится 57 зародыше!, а в 1 м» будет в 100 раз больше (5700).

При проведении анализа чашки Петри с агаром размещают непарно, затем выводят среднее арифметическое из двух или трех чашек.

Для определения качественного состава микроорганизмов, колонии на чашках группируют по культураль-ным признакам, из каждой группы готовят препараты и микроскопируют их.

По морфологическим и культуральным признакам устанавливают род, а в отдельных случаях и вид бактерий.

Если чашки выдерживают в разных помещениях в одно и то же время, то относительно можно судить о чистоте воздуха каждого помещении. Чем больше пыли в воздухе, тем больше в «ем микроорганизмов. По данным А. Ф. Войткевича, в Арктике под 70° с. ш. в 1 м3 воздуха обнаруживается от 1 до 10 клеток. Морской воздух в таком же объеме содержит 1—2 клетки, городской парк — 200, городская улица —5 тыс., жилое помещение — 20 тыс., скотный двор —1—2 млн.

I. ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР БАКТЕРИЙ

ЧИСТОЙ КУЛЬТУРОЙ БАКТЕРИЙ НАЗЫВАЮТ культуру, ПОЛУЧЕННУЮ из ОДНОЙ КЛЕТКИ. ОНА НЕОБХОДИМА ДЛЯ изучеНИЯ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ, физиологических особенностей организма и для установления видовой принадлежности (для таксономии). С этой целью сначала из различных мест обитания необходимо получить накопительную КУЛЬТУРУ, в которой преобладают -представителя данной группы микроорганизмов. Для этого СОЗДАЮТ элективНЫЕ (избирательные) условия среды, обеспечивающие ПРЕИМУЩЕСТВЕННОЕ РАЗВИТИЕ выделяемых МИКРООРГАНИЗМОВ.

Чистая культура ИЗ накопительной МОЖЕТ быть получена или ИЗ ОДНОЙ клетки, или из ОТДЕЛЬНОЙ колонии. В последнем случае из накопительной культуры или после ее разведения ДЕЛАЮТ высев НА плотную среду по методу Коха.

Образовавшуюся на плотной среде колонию считают развившейся из одной клетки.

При выделении ЧИСТЫХ культур АЭРОБНЫХ микроорГАНИЗМОВ ВЫСЕВ ИЗ НАКОПИТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ ПРОВОДЯТ НА ПОВЕРХНОСТЬ ПЛОТНОЙ СРЕДЫ. НАНЕСЕННУЮ каплю накоПИТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ (или из СООТВЕТСТВУЮЩЕГО развеДЕНИЯ ее) осторожно распределяют СТЕРИЛЬНЫМ стеклянным шпателем ПО ПОВЕРХНОСТИ плотной среды, после чего этим же шпателем протирают поверхность среды последующих 3—4 чашек.

страница 27
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(24.08.2019)