медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА БАКТЕРИЯ

При определении вида бактерий учитывают морфологические, кулыгуральныё, биохимические и. физиологические признаки.

Морфологические признаки: форма, размеры, расположение (у палочковидных отмечают еще концы клеток), способность к движению и характер размещения жгутиков, способность к спорообразованию, форма и расположение спор, наличие капсул и клеточшых включений, отношение к окраске по Граму и кислотоустойчи-вость.

У актиномицетов важным морфологическим признаком являются также органы плодоношения (изучают их на среде Чапека с глюкозой и мелом); отмечают строение мицелия, характер его ветвления, форму спором осцев и спор.

Для изучения морфологических признаков микроорганизмы выращивают на синтетических и естественных средах.

Культур ал ьные признаки: характер роста культуры на мясо-пептонном бульоне (или другой жидкой среде); характер роста колоний на мясо-пептонном агаре и других плотных средах (сусло-агаре и агаризованной синтетической среде).

При росте на МПБ и жидких средах отмечают: характер развития пленки (тонкая, сухая, складчатая, слизистая и цвет пленки); наличие мути (слабая,, умеренная, сильная); наличие и характер осадка (обильный, плотный, хлопьевидный, цвет осадка).

Характер роста при посеве уколом* (отмечают в верхней, средней и нижней части укола).

При характеристике актиномицетов обращают особое внимание на пигменты и обусловленную ими окраску культуры (окраска колоний в целом, мицелия, воздушного мицелия и среды). Пользуются специальными пособиями (шкала цветов Бондарцева) для определения цвета. Значение имеют консистенция колонии (плотная, кожистая", рыхлая); поверхность (мучнистая, бархатистая) и запах (землистый, эфирный, фруктовый и т.д.).

•Иглу с культурой микроорганизмов вводят в столбик -агара, находящийся в пробирке, и прокалывают его до конца,

? Тмч> е. з. 81

Физиолого-биохимические признаки. При изучении этих признаков микроорганизмов исследуют: ферментативную активность; отношение бактерий к различным источникам углерода и азота; продукты жизнедеятельности, накапливающиеся в среде {кислоты, спирты, газы); отношение к кислороду и щелочам; отношение к различным факторам внешней среды.

Ферментативная активность. При изучении биохимических особенностей культуры определяют активность протеиназ по разжижению желатины (скорость и характер разжижения при уколе столбика желатины, рис. 12); свертывание и пептоннзацию молока (отмечается кислотное свертывание по покраснению синей лакмусовой бумаги с образованием устойчивого сгустка и коагуляции с последующей пептоаизацией), а также пептоннзацию без предварительного свертывания и скорость изменения молока; активность амилазы по величине зоны гидролиза крахмала (проба с раствором Люголя на 3—4-е сутки посева культуры штрихом на крах.мало-аммиачном агаре); активность целлюлозы по степени эспада клетчатки на среде Гетчинсона; активность -фруктофуранозидазы (инвертазы) по гидролизу сахарозы (с помощью реактива Фединга ); активность уреа-зы по накоплению аммиака (используется реактив Нес-слера), нитратредуктязы по восстановлению нитрата (на среде Гильтая) до нитрита (нитрит проверяют в кислой среде реактивом цинк-йод-крахмалом).

У актиномицетов, кроме того, один из важных биохимических признаков —образование антибиотиков.

Отношение к источникам углерода. Для установления доступных источников углерода готовят синтетическую среду, содержащую (в г на 1 л дистиллированной воды):

(NH.)sHPO. .... 3,0 CACL, ....... 0,1

КН4РО, ...... 2,0 FeCI, 0,01

N«C1 0,5 Смесь микроэлементов по

MgSO, . i , ...» 0,3 М. В. Федорову — 1 мл

К минеральной среде добавляют 1% источника углерода. Обычно испытывают: пентозы — арабиноза, ксилоза; гексозы—глюкоза, левулеза, галактоза (эти вещества стерилизуют при 100°С в кипятильнике Коха); джахариды—сахароза, мальтоза, лактоза; полисахариды— декстрин, крахмал, клетчатка; соли органических кислот — муравьиная, уксусная, масляная, янтарная, щавелевая, щавелевоуксусная, яблочная, винная, лимонная, пировиноградная, глюконовая, салициловая, бензойная и протокатеховая; спирты — этиловый, глицерин, эритрит, мапнит, дульцит; жиры и углеводороды.

Отношение к источникам азота. При испытании источников азота в основной минеральной среде аммоний фосфорнокислый заменяют двузамеще.нным фосфорнокислым калием (КзНРО») и к среде добавляют глюкозу или другой доступный углевод в 1 %-ной концентрации'. Б качестве источника азота обычно используют: альбумин, пептон, аспарагин, глицин и другие аминокислоты, мочевину, аммиачные, азотисто- и азотнокислые соли в количестве 0,1—0,2% объема питательной жидкости и молекулярный азот.

Изучение продуктов жизнедеятельности. При использовании источников углерода (в частности, углеводов) в качестве продуктов жизнедеятельности нередко образуются газы, кислоты и спирты

Для обнаружения газов иа твердых средах используют посев уколом, в агаровую среду в пробирке (при появлении газов столбик агара разрываетс

страница 29
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(18.08.2019)