медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

я) или в жидкую среду с перевернутыми вверх дном поплавками .

•Поплавок—небольшая узкая пробирка (0,5X3—4 см). Его опускают (вверх дном) в обычную пробирку с жидкой средой, ко торая при стерилизации заполняет поплавок. При развитии микрт организмов, образующих газы, последние вытесняют жидкость из поплавка.

6 83

Образование кислот при посеве на средах, содержащих углеводы, устанавливают при помощи индикатора боомтимолбляу) и количественно по титрованию их ,1 я. щелочью. При наличии мела кислоты связываются в виде кальциевых солей, которые можно обнаружить добавлением к 5 мл среды 1 мл концентрированного раствора щевелевокислого аммония. В присутствии кислот выпадает белый осадок, нерастворимый в воде при подкйслении уксусной кислотой. Образование спирта устанавливают при отгоне части субстрата! с» последующей пробой на спирт ((реакция на появление йодоформа).

При изучении доступных источников азота в качестве продуктов жизнедеятельности часто появляется аммиак (проба с реактивом Несслера), сероводород и меркаптаны (проба с фильтровальной бумагой, смоченной уксуснокислым свинцом), индол (проба с азотистой кислотой), нитрит (проба с цинк-йод-крахмалом в кислой среде). Рсдуктазную способность • исследуемых культур выявляют обесцвечиванием метиленовой Сини.

?' Отношение бактерий к кислотам и щелочам. Для этой цели к питательной среде добавляют буферные смеси для поддержания соответствующего рН (для рН от 3,6 до 4,0—цитратно-фосфатный буфер; от 4,5 до 9,2 —фосфатный; выше 9,0 — буферные смеси, состоящие из различных соотношений Na8C08 и НО, а также NaOH и К2НР04). После 8—10 дней при 28—30°С по росту клеточной массы устанавливают предельные значения рН, при которых еще возможно развитие бактерий.

Отношение к кислороду. Об отношении к кислороду судят по росту культуры при посеве уколом в пробирку с агаровой или желатиновой средой. Аэробы развиваются в верхней части укола (рост в виде «гвоздя»), факультативные анаэробы —равномерно по всему уколу, анаэробы — в нижней его части.

Устойчивость к различным факторам внешней среды (температуре, свету, концентрации солей, высушиванию и замораживанию). Для определения стойкости микро: организмов к концентрациям солей выращивают культуру на основной питательной среде с добавлением доступного источника углерода и азота и NaCl иди NajS04 в разных концентрациях. После инкубация при температуре 28—30°С по росту клеточной массы устанавливают оптимальные, максимальные и минимальные концентрации солей.

Для выявления устойчивости к температуре культуры на питательной среде (лучше жидкой) помещают в политермостат при разных температурах. Затем по росту клеточной массы выявляют оптимальные, минимальные и максимальные температуры. Аналогично, создавая соответствующие условия, обнаруживают влияние других факторов внешней среды на развитие микроорганизмов.

Отношение бактерий к антибиотикам. Его можно выявить на агаровых пластинах методами агаровых блоков или штриха .

В чашки Петри на агаровой питательной пластине, Густо засеянной тест-организмом, накладывают агаровые блоки с антибиотиками. Для получения блоков с этими веществами на поверхность питательной среды (на которой выращивают продуцент антибиотиков) высевают сплошным «газоном» соответствующую культуру микробов.

После того как эти микробы разовьются и образуют антибиотические вещества, диффундирующие в толщу агара (-бактерии на 4—Б-е сутки, грибы на 6—-8-е и актиномицеты на 8—10-е), стерильным пробочным сверлом вырезают агаровые блоки.

По окончании инкубации в термостате (время ее зависит от скорости роста тест-культуры) вокруг агаровых блоков с антибиотиками возникают зоны, где не наблюдается роста тест-организма. По диаметру зоны судят о его чувствительности к тем или иным антибиотикам.

При использовании метода штриха на питательный агар в чашки Петри по диаметру высевают культуру продуцента антибиотика. К выросшему организму вплотную подсевают перпендикулярно штрихи тест-культуры. Нечувствительные к антибиотику тест-культуры развиваются от края штриха продуцента. Чем чувстйительнее тест-организм к антибиотику, тем дальше он развивается от штриха.

Для продуцента антибиотиков актиномицетов важным признаком является специфика антагонизма и антимикробный спектр.

Глава VIII

ПРЕВРАЩЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМАМИ БЕЗАЗОТИСТЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ

Микроорганизмы в основном получают энергию при освобождении ее из безазотистых органических веществ. Только небольшая часть бактерий может использовать солнечную энергию или энергию окисления минеральных соединений. В зависимости от того, как освобождается анергия из энергетического материала, различают брожение (освобождение энергии, происходящее без доступа свободного кислорода) и дыхание (или окисление), когда выделение энергии происходит в аэробных условиям В последнем случае энергия освобождается полностью и в качестве конечных продуктов окисления выделяются С02 и Н20.

ПРОЦЕССУ БРОЖЕНИЯ

Брожение сопровождается частичным высвобождением энергии, связанной

страница 30
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(23.04.2019)