медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

глекислый газ, образующийся при брожении, определяют по разности массы колбы при постановке опыта и после его окончания. Конец брожения ? устанавливают по прекращению газообразования. Брожение обычно продолжается 2—3 дня. Несмотря на то что колбу взвешивают только на технических весах, учет углекислого газа получается достаточно точный, так как его в процессе брожения выделяется ?много (на долю С02 приходится почти 50% сброженного сахара):

QHiA=2СН3С112ОН + 2С02 •

180 2X46=92 2X44=88

•В опыте среда содержит 15 г сахара. Из этого количества может выделиться около 7—7,5 г С02.

= 12,3 сброженного сахара.

=6,3 г спирта

Расчет количеств образовавшегося спирта и сброженного сахара. По массе выделившегося углекислого газа легко рассчитать количества образовавшегося спирта и сброженного сахара. Например, образовалось 6 г СО». 88 — 92 6 г— X 6.92

83

Определение интенсивности брожения. Под интенсивностью брожения понимают количество сброженного сахара в процентах от исходного за определенный промежуток времени.

15

Если 100 мл среды содержат 15 г сахара, то 12,3 г сброженного сахара СОСТАВЯТ: 15—100% 12,3 — X 12,3.100 —82, т.е. интенсивность БРОЖЕНИЯ РАВНА 82%.

Микроскопическое изучение дрожжей. Познакомиться с морфологией дрожжей можно путем микроокопиро-вания бродящей жидкости. Для этого стеклянной палочкой наносят каплю культуралыгой жидкости на предметное стекло, закрывают покровным стеклом и после нанесения капли кедрового масла микроскопируют с иммерсионной системой объектива. При микроскописо-вании препарата в раздавленной кашле конденсор следует немного опустить.

При микроскопировании препарата следует поискать клетки в стадии почкования и зарисовать их (рис. 14).

Определение этилового спирта. После взвешивания бродильных колб и определения С02 культуральную жидкость переносят в плоскодонную круглую колбу емкостью 700—800 мл для отгона этилового спирта.

Колбу, соединив с обратным холодильником, устанавливают на асбестовой сетке над газовой горелкой и начинают нагревать. Жидкость закипает. Спирт летит вместе с парами воды и, охлаждаясь в холодильнике, каплями стекает В приемную колбу. При анализе интересно получить несколько последовательных порций отгона. Для этого ставят 3—4 приемные колбы (в каждую набирают примерно 10— 15 мл отгона).

Пробы из разных порций наносят иа фарфоровую пластину и зажигают. Первые порции отгона горят интенсивнее, так как они содержат больше спирта, чем последующие порции.

Первые две-три фракции используют для проведения качественных реакций на этиловый спирт.

Качественные реакции на этиловый спирт. Получение йодоформа (СПЬ). Реакция основана на том, что спирт с кристаллическим йодом в щелочной среде при нагревании до 60—70"С образует йодоформ..

Берут в пробирку 3—5 мл отгона, прибавляют столько же 20%-ного раствора NajS03 и около 0,1 г кристаллического йода в порошке. Смесь взбалтывают, нагревают на водяной бане при 60—70°С до полного растворения йода и его обесцвечивания. При охлаждении выпадают мелкие светло-желтые кристаллы йодоформа с характерным резким запахом.

Образование СН13 из спирта протекает по следующей реакции:

СНэСН2ОН +1г=СНзСНО+2Ш СН3СНО+312=С13СНО+ЗШ CIjCHO*+N аОН = CHIS + IICOONa.

Из летучих органических соединений йодофор.меиную пробу дают уксусный альдегид и ацетон, в отсутствии которых в отгоне убеждаются с помощью фуксииеерни-стой кислоты или аммиачного раствора серебра. В присутствии альдегидов фуксинсернистая кислота краснеет, а аммиачный раствор серебра чернеет от выпадения металлического серебра.

Перевод спирта в уксусный альдегид с тмощью двухромовокислого калия. К 5 мл отгона прибавляют несколько капель 10%-ного раствора H2SG4 и небольшой кристалл КгСг2От. При слабом нагревании образуется уксусный альдегид (температура кипения 21 °С). Для его обнаружения покрывают отверстие пробирки фильтровальной бумагой, смоченной аммиачным раствором азотнокислого серебра. При наличии спирта образуется уксусный альдегид и бумажка чернеет.

Материалы и оборудование Питательная СРЕДА С САХАРОЗОЙ, ДРОЖЖИ, ПЛОСКОДОННЫЕ КОЛБЫ ЕМКОСТЬЮ 250 МЛ с ЗАТВОРОМ МЕИССЛЯ, весы Н РАЗНОВЕСЫ, ЦИЛИНДРЫ на 100 мл, ЭТИКЕТКИ, КОЛБА ЕМКОСТЬЮ 700—800 МЛ, ОТГОННЫЙ АППАРАТ ЛИБНХА, МИКРОСКОПЫ Я ВСЕ НЕОБХОДИМОЕ ДЛЯ кикроскстшроваиия, ПРОБИРКИ, 20%-НУЙ РАСТВОР Na,COfc КРИСТАЛЛИЧЕСКИЙ ЙОД, НЕБОЛЬШОЙ СТЕКЛЯННЫЙ ШПАТЕЛЬ И ВОДЯНАЯ БАНЯ С ВОДОЙ.

91

2. МОЛОЧНОКИСЛОв КРОЖВ4ИЕ

Молочнокислое брожение лежит в основе силосования, квашения овощей, переработки молока в кисломолочные продукты и сыр; кислый вкус черного хлеба определяется молочной кислотой. Это брожение вызывается группой молочнокислых бактерий, которая очень разнообразна и широко распространена в природе.

Молочнокислые бактерии обитают на поверхности ?растений, в молоке, на пищевых продуктах, в кишечнике человека и животных. Они имеют много общих признаков, важнейшие из них следующие: образуют молочную кислоту, положительно окрашиваются по Граму, обычно не образуют шор, неподвижн

страница 32
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(19.02.2019)