медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ы, кокки или па-.лочкн требовательны к источникам азота (многие не развиваются на простых синтетических средах), не образуют каталазу, которая расщепляет перекись водорода на воду и кислород. Если на колонию молочнокислых бактерий на питательной среде нанести каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, выделения кислорода не наблюдается. Колонии бактерий, образующих каталазу, в этих условиях покрываются пузырьками кислорода.

Молочнокислые бактерии можно разделить на две группы: 1) гомоферментативные, образующие из сахара в основном молочную кислоту по уравнению;

C6H1S06 —? 2CH3CHOIICOOH,

2) гетароферментативные, которые наряду с молочной кислотой образуют значительные количества побочных продуктов:

QH.jOe—КЛ13СНОНСООН + СНзСООН + -г-СН2ОНС1 ЮНСНЮН+CIUCHjOH f co8

Молочнокислые бактерии сбраживают моно- и диса-хариды. Часто те из них, которые обитают в молоке, сбраживают лактозу, но не сбраживают или хуже сбра7 живают сахарозу. Молочнокислые бактерии, распространенные на растениях, лучше сбраживают сахарозу.

В качестве источника азота эта группа бактерий использует пептоны, смесь аминокислот. Требовательна к витаминам.

Для изучения молочнокислого брожения лучше всего в качестве питательной среды воспользоваться моло92

ком. В нем имеются все необходимые питательные элементы для развития молочнокислых бактерий. В этой среде могут хорошо- развиваться и другие бактерии (гнилостные, масляиокислые), однако молочнокислые быстро подавляют их развитие вследствие накопления молочной кислоты.

Критические значения рН для развития разных групп бактерий;

Групп» батери» рН

Молочнокислые 4,0—3,5

Маслянокислые Б.°—*.7

Гнилостные ? • 5.5—5,0

Постановка опыта проста. Определив начальную кислотность' молока (титрованием 0,1 и. NsOH 10 мл молока с добавлением 20 мл дистиллированной воды и 2—3 капель фенолфталеина), разливают его в эрленмейеровские колбы объемом 100 мл приблизительно по 40—50 мл, закрывают их ватными пробками. Параллельно осуществляют второй вариант опыта. Разлив молоко в колбы, закрывают их ватными пробками, ставят на асбестовые сетки и доводят молоко до кипения. Колбы с кипяченым и некипяченым молоком помещают в термостат при 30°С.

Через 10—12 ч свежее (некипяченое) молоко скисает. В колбе образуется ровный плотный сгусток без следов газа (если в опыте используется хорошее молоко). Сгусток получается вследствие того, что молочная кислота реагирует с казеинатом кальция и казеин выпадает в осадок.

В кипяченом молоке молочнокислые бактерии, поскольку они не образуют спор, погибают, споры- же маслянокислых бактерий сохраняются. При инкубации в термостате они прорастают, осуществляют маслята окисле* брожение лактозы. .В результате реакции масляной кислоты с казеинатом кальция в этом варианте также выпадает казеиновая кислота. В дальнейшем она подвергается пептонизации; осадок переходит в кремовую жидкость с неприятным запахом масляной кислоты (запах пота) и прогорклым вкусом.

Микроскопическое исследование молочнокислых бактерий. Если простокваша долго сохраняется при комнатной температуре, то на ее поверхности появляется белая бархатистая морщинистая пленка. Такая же плевка

fi

обычно наблюдается на поверхности рассола при квашении огурцов, капусты и других овощей. Это молочная плесень Geotrkhum candidum (Oidium lactis), которая всегда сопутствует молочнокислому брожению и является нежелательным его спутником. Она окисляет молочную кислоту, образуемую молочнокислыми бактериями, до COs и Наб. и кислотность снижается. Кисломолочные и квашеные продукты начинают портиться, так как в этой среде получают развитие гнилостные бактерии.

Молочная плесень —аэробная форма, поэтому она развивается только на поверхности. Близко примыкает к дрожжам. Имеет многоклеточный мицелий, который распадается на отдельные клетки, так называемые оидии, по форме напоминающие дрожжи и служащие для размножения.

Для микроскопических наблюдений над молочнокислыми бактериями готовят препарат из прокисшего молока. Бактериологическую петлю вводят в сгусток и, повернув вокруг оси, извлекают, прикасаясь ею и к пленке. Сгусток размазывают на предметном стекле очень тонким слоем без воды. Сушат на воздухе. Фиксируют смесью спирта с эфиром (приблизительно 1:1), несколько раз нанося смесь иа мазок и сливая ее. При такой фиксации не только погибают и прикрепляются к стеклу бактерии, но и параллельно эфиром извлекается и удаляется жир. Это необходимо, потому что капли жира иа препарате мешают окраске и микроокопиро-ваиию.

Фиксированный препарат окрашивают метиленовым сииим 1 течение 2—3 мии, промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсией. Метилетювый синий— лучший краситель для молочнокислых бактерий в

Рис 16. Возбудители молочнокислого брожения;

а — laelobacltrium bvlgerteum; 6 — Streptococcus tertto.

молоке, так как он слабо окрашивает основной фон (казеин) и хорошо окрашивает клетки; получаются наиболее четкие препараты (рис. 15).

На препарате преобладают мелкие округлые клетки Stre

страница 33
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(20.02.2019)