медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ptococcus lactis, соединенные в короткие цепочки (рис. 15,6). Этот микроорганизм является возбудителем естественного скисания молока в наших широтах. Оптимальная температура его развития 30°С. Ом накапливает до 11 молочной кислоты. Нередко на препарате наблюдаются тонкие палочки рода Lactobacte-rium, варьирующие в размере, иногда содержащие зерна волютина. Чаще встречается Lactobacterium bulgaricutn (рис. 15, а)—возбудитель естественного скисания молока в южных широтах. Оптимальная температура его развития 40°С. Кислотоустойчив, накапливает до 3,5% молочной кислоты. На плотных средах этот микроорганизм образует мелкие характерные колонии в виде комочков ваты.

Если на поверхности прокисшего молока появилась пленка, то в мааке обнаруживается также и молочная плесень (рис. 16), четырехугольные или овальные клетки которой отличаются от молочнокислых бактерий своими размерами.

Определение накопившейся молочной кислоты. Количество ее определяют по разности миллилитров ОД н. NaOH, пошедшей на титрование молока в конце опыта и при постановке.

Для титрования берут 5—10 мл (лучше 10 мл) молока (свежего или прокисшего), помещают в колбу Эрленмейера емкостью 100 мл, добавляют двойное количество (20 мл) дистиллированной воды, 1 2 капли фенолфталеина и титруют 0,1 и. раствором NaOH при постоянном взбалтывании до появления устойчивой слабо-розовой окраски. Если на поверхности прокисшего молока образовалась планка, то, прежде чем взять сгусток, ее сдвигают пипеткой или стеклянной галочкой в сторону, затем разбивают сгусток, постукивая колбой о-ладонь.

95

ребра готовят следующим образом: к 1—2 мл 10%-ного раствора AgNC>3 в пробирке добавляют по каплям аммиак; сначала появляется осадок Ag20, который затем растворяется в избытке аммиака). Этим раствором и смачивают фильтровальную бумагу. Аккуратно, чтобы не разорвать, прижимают ее к краям горла колбы, продолжая нагревание. Уксусный альдегид улетучивается и, реагируя с аммиачным раствором AgNOs, вызывает почернение бумаги с серебристой побежалостью. Выделяется металлическое серебро. Реакция вполне надежна.

Реакция с тиофеном, К 1—2 мл фильтрата в пробирке прибавляют 5 мл крепкой серной кислоты и 0,5 мл насыщенного раствора CuSCv Смесь взбалтывают, нагревают в течение 5 мин на водяной бане при 100°С и после охлаждения добавляют несколько капель 0,2%-ного спиртового раствора тиофена. В присутствии молочной кислоты получается вишнево-красное окрашивание. Реакция очень чувствительна и специфична.

Материалы и оборудование. Свежее молоко, колбы емкостью 100 мл, цилиндр объемом 100 мл, пипетки на 5 и 10 мл, 0,1 н. раствор NaOII, фенолфталеин, треножник с сеткой, микроскопы i все необходимое для приготовления препаратов, воронки, фильтры, 10%-ный раствор AgNOs, 13%-иый раствор Ы!,ОН, серная кислота (плотность 1,84), 5%-иый раствор КМпО», метиленоемй синий,

3. МАСЛЯНОКИСЛОЕ БРОЖЕНИЕ

Возбудители мвелмюкислого брожения — строгие анаэробы, подвижные палочки с клОстридиальным или плектридиальным типом спорообразования.

По преобладанию тех или иных конечных продуктов маслянокислое брожение подразделяется на: 1) собственно маслянокислое брожение (брожение глюкозы, крахмала); 2) ацетсиобутиловое брожение; 3) брожение пектиновых веществ.

Маслянокислые бактерии широко распространены в почве (до 90% почвенных образцов, как правило, содержат эти бактерии), навозе, загрязненных водоемах, на разлагающихся растительных остатках, в молоке, на поверхности растений и т. д.

Собственно маслянокислое брожение осуществляется по уравнению:

С6Н1206—.СН,СН2СН2СООН +2С08+2Н2 ..

? Теппер Е. 3, 97

Кроме масляной кислоты, в процессе брожения в заметных количествах образуется уксусная кислота, а при смещении реакции в кислую сторону (до рН 5,5) — в больших количествах бутиловый спирт и ацетон.

Энергетическим материалом для маслянокислых бактерий служит ? крахмал, водорастворимые углеводы типа декстринов, ди- и моносахаридов, органические кислоты (молочная и пировиноградная) и спирты—ман-иит и глицерин. В качестве источника азота они используют самые различные азотистые соединения; пептон, аминокислоты, аммиачные соли, а некоторые даже атмосферный азот.

Характерная особенность маслянокислых бактерий — способность накапливать в клетках гранулезу в период образования спор и перед ним.

Для изучения маслянокислого брожения можно воспользоваться питательной средой, состоящей из мясо-пёптонного бульона с добавлением 3—5% глюкозы.

Чтобы в этой среде развивались преимущественно маслянокислые бактерии, следует создать в ней строго анаэробные условия и после заражения ее почвой нагреть до кипения. При нагревании споры маслянокислых бактерий остаются жизнеспособными, а попавшие с почвой неспороо&разующие бактерии погибают.

Опыт ставят следующим образом. В колбу Вюрца объемом 250—500 мл наливают 30—60 мл питательной среды, вносят примерно 0,5 г почвы для заражения и четверть чайной ложки мела для нейтрализации образующейся в процессе брожения масляной кислоты. На асбестовой сете нагреваю

страница 34
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(26.04.2019)