медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

х микробов.

При отсутствии гелевых пластин микроорганизмы, окисляющие клетчатку, можно выявить по методу В. Л. Омелянского. Для этого в эрленмейеровскис колбы емкостью 100—150 мл наливают 30 мл питательной среды, содержащей 0,1% NH.C1, 0,05% К2НР04 и водопроводную воду.

В этот раствор погружают складчатый фильтр конусом врерх. На границе между воздухом и средой на клетчатке будут развиваться аэробные целлюлозоразру-шающис бактерии.

Миксобактерии из рода Somngium легко обнаруживаются в подзолистых почвах, под луговой растительностью и на окультуренных почвах, В этих нее почвах при благоприятном азотном режиме можно выявить еще и Ccllvibrio, а в унавоженных почвах — Cytophaga. В степных почвах наряду с грибами встречаются миксобактерии рода Polyangium.

Материалы и оборудование. Г елевые пластины, пропитанные средой для целлюлозоразрушающщ бактерий, покрытые кружком фильтровальной бумаги (при отсутствии гелевых пластин следует изготовить жидкую минеральную среду Омелянского), образцы свежея почвы, часовые стекла, трафареты и стеклянные палочки с заостренным концом, кружки фильтровальной бума™, мерные цилиндры на 100 мл, колбы Эрленмейера емкостью 100—150 мл, микроскоп и все материалы для получений окрашенных препаратов и микроскоп ирования.

7. ОКИСЛЕНИЕ ЖИРА

Жир попадает в почву с растительными и животными остатками, с отмершими клетками микроорганизмов. Микроорганизмы, окисляющие жир, выделяют фермент липазу, который вызывает гидролиз жира по уравнению; С3Нв(СшН3,02) j+ЗНОН- С3Н5 (ОН)3 + зсин86о2..

Продукты гидролиза в дальнейшем окисляются до углекислого газа и воды:

СшНзвОг+260г= 18С02-И8П20.

3, Для знакомства с процессом окисления жира и его возбудителями достаточно сначала приготовить элективную минеральную среду, не содержащую источника углерода, — срежу Рана:

KsHPO, —5 г; CaClj - 1 г; (NH.)3PO. —5 г; NaCl— следы; MgSO< — 1 г; FeClj—следы, дистиллированная вода — 1л, Затем наливают 30 мл в эрленмейеровскую колбу емкостью 100 мл и добавляют одну треть чайной ложки почвы (для внесения возбудителей процесса). В качестве источника углерода добавляют жир — кусою/

106

чек расплавленного свиного сала или говяжьего жира. Хорошо получается культура жиро-окисляюших бактерий и грибов на касторовой масле. В 30 мл среды достаточно внести 1 мл масла.

По мере развития жи-роокисляющих микроорганизмов прозрачное касторовое масло превращается в белые хлопьи нерастворимых в воде. Рис 21. Pseudomonas fiuo- ЖНрВЫХ кислот.

rescens. О степени омыления жира можно судить по его кислотному числу, которое определяют титрованием раствора жира и жирных кислот в смеси спирта с эфиром (1:1) 0,1 в. спиртовым раствором КОИ.

В качестве индикатора при титровании применяется фенолфталеин.

Для микроскопических наблюдений готовится препарат с поверхности жирных кислот или из жидкости

колбы. ' !'"

Сушат препарат при комнатной температуре, фиксируют смесью спирта с эфиром (1:1), удаляя одноврс-. менно остатки жира, затем красят фуксином.

При мнкроскопированни можно обнаружить несло роносную палочку типа Pseudomonas fluorescein (рис. 21), Pseudomonas stutzerl. иногда на жире развиваются актиномицеты и грибы Ceotrichum candidutn (Oidlum lactis).

Материалы и оборудование. При постановке опыта; минеральная среда Ране, свежая почва, колбы Эрлсйнмейера емкость» 100 мл, мерные цнлнидры на 200 мл, алюминиевые ложки (или металлические, или фарфоровые шпатели), пипетки Мора на 1 мл.

При анализе опыт- микроскопы и все для приготовления окрашенных препаратов н микроскопировання, смесь спирта с эфиром (1:1), бюретви с 0,1 н. NaOH, фенолфталеин.

В. ОКИСЛЕНИЕ УГЛЕВОДОРОДОВ

В связи с широкой механизацией сельского хозяйства в почву попадает значительное количество углеводородов. Так, керосин и бензин, используемые в качестве топлива в тракторных, автомобильных и других двигана

телих, являются продуктами перегонки нефти или переработки нефтепродуктов. В их состав входит высокий процент парафиновых, нафтеновых в ароматических углеводородов. В почве эти продукты подвергаются окис лению микроорганизмами.

Для получения накопительной культуры углеводо-родокисляющих бактерий в колбу емкостью 250 мл наливают 100 мл жидкой питательной среды (или в колбу емкостью 150 мл —30 мл среды) следующего состава (в %): KNOS-0,4; KHsPO4-0,06; NasHPO„—0,06; Na2HPO.• 12H20 — 0,14; MgSO, ? 7H20 — 0,08; водопроводная вода (рН среды — 7,2—7,3 — устанавливают по бромтимолблау.

В качестве единственного источника углерода добавляют 2 мл керосина или 2 мл вазелинового масла. Для заражения среды в колбу помещают одну треть чайной ложки почвы из пробы, отобранной у бензоколонки или у гаража. Колбы помещают на качалку в термостат при

После 4—6-дневной инкубации опыт снимают. Для знакомства с микроорганизмами, окисляющими углеводороды, из накопительной культуры готовят фиксированный и окрашенный препарат. Углеводороды хорошо окисляют представители микобактерий (Mycoplana bu-lata), Arihrobacter и нокардии.

Материалы м

страница 37
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(20.02.2019)