медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

: маннит или тростниковый сахар —20,0; К2НРС)4 — 1,0; MgS04 — 0.5; NaCl —0,5; FeSO4-0,01; MnS04- -0,01; СаСОз - 5,0.

После упаривания среды до исчезновения избыточной влаги на поверхности геля раскладывают (по трафарету) 50 комочков почвы. С этой целью берут два часовых-стекла, после фламбирования их в одно часовое стекло помещают исследуемую почву, а в другое —дистиллированную воду. Палочку с оттянутым концом проводят над огнем, смачивают водой и захватывают ею комочек почвы диаметром примерно 2 мм, который помещают на поверхности гелевой пластины. Элективность среды создается отсутствием связанного азота и аэробными условиями среды.

• Чашки- с посевом помещают во влажную камеру, и

128 после 5—6 дней инкубации при наличии клеток азотобактера комочки почвы обрастают его колониями.

Для сравнительной оценки населенности азотобактера в разных почвах определяют процент обросших комочков почвы азотобактером от общего числа комочков на чашке. Это дает возможность установить, какая почва богаче азотобактером.

Если колонии со временем приобретают бурую ок» раску, их относят к Azotobader chroococcum; если колонии образуют зеленый флуоресцирующий пигмент, то в зависимости от морфологии их можно отнести либо к Az. agile, либо к Лг. vinelandii (Лг. agile, как правило, обитает в воде). Бесцветные слизистые колонии образуют Лг. beijerinckii, их можно обнаружить в кислых тропических почвах (красноземах).

Для знакомства с возбудителями аэробной азотфик-сации из колонии готовят фиксированный и окрашенный препарат и просматривают с иммерсионной системой объектива. Клетки азотобактера шаровидные, среди ню часто встречаются диплококки.

Для получения накопительной культуры азотобактера можно использовать жидкую среду Бейеринка (в г на 1 л водопроводной воды): маннит (или глюкоза) — 20,0; KjHP04 0,2; CaCOs —5,0; смесь микроэлементов по Федорову — 1 мл ; MgS04- 0,2.

В колбы Эрленмейера емкостью 100 мл наливают 30 мл жидкой среды для азотобактера и добавляют одну треть чайной ложки почвы. Колбы помещают в термостат при 28-30°С. После 5—6 дней инкубации опыт снимают; на поверхности среды при наличии азотобактера образуется пленка.

Для выделения чистой культуры азотобактера после проверки культуры под микроскопом делают посев на агаризованную среду Эшби следующего состава (в г на 1 л): маннит —20,0; КгНРО 0,2; MgS04—0,2; NaCl—0,2; K2S04 —0,1; СаСОа —5,0; агар —20,0.

л 0,5;

9 It

129

Материалы и оборудование. Для постановки опыта: гелевые пластаны, пропитанные средой Виноградского для азотобактера (при отсутствии гелевых пластин используют жидкую питательную среду Виноградского иди Бейеринка), часовые стекла, почвенные пробы, палочки с оттянутый концом, цилиндры, колбы Эрленмейсра на 100 мл.

Для анализа опыта: микроскопы и все необходимое для мнкро-скопкроваиня.

Глава Ж

ПРЕВРАЩЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМАМИ СОЕДИНЕНИЙ СЕРЫ, ЖЕЛЕЗА И ФОСФОРА

1. ПРЕВРАЩЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМАМИ СОЕДИНЕНИЯ СЕРЫ

Окисление сероводорода. Образующийся в почве и загрязненных водоемах сероводород (H2S) окисляется вследствие жизнедеятельности тионовых и серобактерий до HjSO,.

Серобактерии подразделяют иа две группы: бесцветные и окрашенные. К, бесцветным относятся различные виды Beggiatoa (свободноплавающие длинные 'нити) и Thiothrix (отличающиеся неподвижным образом жизни). Внутри клеток серобактерий или непосредственно на их поверхности отлагаются капли серы. По типу углеродного питании они являются миксотрофами. За счет энергии окисления H3S они могут ассимилировать углекислый газ (С02), но одновременно нуждаются также в органических соединениях.

К цветным серобактериям относятся пурпурные и зеленые бактерин-литотрофы, имеющие хлорофилл. Источником энергии для автотрофной ассимиляции СОг служит свет. Фотосинтез у них протекает в анаэробных условиях и ие сопровождается выделением кислорода. Донором водорода для восстановления С02 у них служит H2S, эти организмы — фотоаитотрофы (фотоавто-литот рофы).

Тионовые бактерии — это мелкие одиночные клетки, которые при окислении сероводорода не отлагают серы в клетке и на ее поверхности. Энергию окисления восстановленных соединений серы в серную кислоту они используют для поддержания всех процессов жизнедеятельности, для ассимиляции углерода из COj (они относятся к облигатяым хемоавтолитотрофам).

Для получения культуры серобактерий С. Н. Вино-градский рекомендует на дно высокого цилиндра или

130 аквариума бросить немного ила, гипса для усиления выделения H2S, остатки водных растений и доверху залить водой. Примерно через месяц на поверхности возникает серовато-белая хрупкая пленка, состоящая из крупных нитей серобактерий с отложениями капельножидкой серы. Среди - них наиболее часто встречаются представители рода Beggiatoa.

Доказать присутствие серы в клетках серобактерий можно следующим образом:

1) если добавить к препарату с клетками серобактерий каплю сероуглерода, то капельки жидкой серы в них растворяются;

2) если перенести клетки Beggiatoa, содержащие ка-нельно-жндкую се

страница 44
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(20.08.2019)