медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ру, в чистую воду, в которой hctH2S, то через несколько часов вся сера из клеток исчезнет.

Для выявления тионовых бактерий можно ' использовать среду следующего состава (в г на 1 л дистиллированной воды): Na2SOs (гипосульфит натрия)—5,0; NaIlC08 -1,0; К2НРО4-0,2; NH.C1-0.1; MgCl-0,1.

Среду разливают в эрленмейеропские колбы емкостью 100—150 мл по 30—50 мл и заражают сточной водой или илом. Колбы помещают в термостат при температуре 30°С. Через несколько дней в среде появляется свободная сера и обнаруживаются бактерии, сходные с Pseudomonas, — Thiobacillus thioparus.

Для получения накопительной культуры фотосинте-зирующих серобактерий используют среду Ван-Ниля следующего состава (в %): NaHCOy-0,5; NH4CI —0,1; Na2SH20 —0,1; KH2P04 0,1; MgCl2-6H20 —0,05; NaCl — 0,5; водопроводная вода.

В среду желательно добавить соль органической кислоты (ацетат, малат или сукцинат натрия) в количестве 0,1—0,2%, так как многие фотосинтезирующие бактерии быстрее развиваются в присутствии органических веществ, чем на одной минеральной среде.

Реакцию среды по бромтимолблау устанавливают до рН 7,0-7.5.

В склянки с притертыми пробками емкостью 100— 150 мл вносят 5—10 мл инокулята (исходным материалом может служить ил разных водоемов); затем добавляют питательную среду Вян-Ниля до верха, закрывают стеклянными пробками, вытесняя часть жидкости. Таким образом, в склянках создаются анаэробные условия. Склянки со средой и инокулятом помещают в

9» 131

люминостат с температурой 30°С. После 4—7 дней инкубации в среде развиваются пурпурные или зеленые серобактерии (в зависимости от посевного материала). В случае развития пурпурных серобактерий среда приобретает сначала розовый, а затем красный цвет, при развитии зеленых она окрашивается в желто-зеленый цвет.

Для знакомства с ф ото а ит отр о ф н ы м и бактериями из накопительной культуры готовят препарат в раздавленной капле и просматривают его с иммерсионной системой объектива. В подвижных клетках серобактерий просматриваются включения серы.

Материмы и оборудование. Для выявления тшновых бактерий: жидкая среда с гипосульфитом натрия, ррлснмеВеровские колбы емкостью 100—150 мл, речной ил, сточная вода.

Для получения накопительной культуры фатоавтотрофных серобактерий; среда Ваи-Ниля, склянки с притертыми пробками, нлы из разных водоемов.

ДЛЯ анализа культур: микроскопы и все необходимое для мик-роскопироввиия, приготовления фиксированных препаратов и препаратов в раздавленной капле.

Восстановление сульфатов. Разложение органических серосодержащих соединений (белки, аминокислоты) сопровождается выделением сероводорода. Источником образоваиия сероводорода является также восстановление сернокислых и серноватнетокислых солей. Большое количество сероводорода образуют сульфатре-дуцирующие бактерии в процессе сульфатного дыхания. Эти бактерии в отличие от денитрифицирующих бактерий являются облигатными анаэробами, а в качестве доноров водорода они используют главным образом органические кислоты, спирты и молекулярный водород. Органические субстраты окисляются ими не до конца. Чаще всего конечным продуктом окисления является уксусная кислота. Акцептором водорода у сульфатреду-цирующих бактерий являются сульфаты:

4CHsCOCOOH+H2S04=4CHsCOOH+4C02 + H2S

окиеляеиыв субстрат

Использовать кислород сульфатов в актах дыхания способна лишь небольшая группа микроорганизмов: 1) из Desuljovibrio — D. desulfuncarts и и. vulgaris — вибрионы размером 2—4X1—0,9 мкм, имеющие один полярный жгутик (рис. 29), и 2) из рода Desulfomacu*

lum — D. nigricans — палочки с пернтрихальным расположением жгутиков, преимущественно распространены в иле (где происходит анаэробный распад органических веществ) и в загрязненных водоемах (1 мл жидкости содержит 10-e—10-7 клеток этого рода).

Для получения накопительной культуры сульфатредуцирующих бакте- рис, 29. Desalfovibrto demlfrrkam. рий можно использовать жидкую среду Ван-Дельдена следующего состава (в г на I л воды исследуемого водоема): натрий молочнокислый (можно заменить виннокислым, яблочнокислым или янтарнокислым) — 5,0; аспарагин— 1,0; MgS04 — 1,0; К2НР04 0,5. Значение Н довести до 7,0. К среде рекомендуется добавить ,1—0,5 г лимоннокислого железа, при образовании сероводорода среда окрашивается в черный цвет.

В стеклянный сосуд наливают 5—10 мл инокулята (сероводородный ил или вода из загрязненного водоема) и добавляют среду Ван-Дсльдена для сульфатреду-цирующнх бактерий, затем сосуд закрывают пробкой со стеклянной трубкой (расширенной в середине) таким образом, чтобы пробка вытеснила часть жидкости в трубку. К жидкости в трубке добавляется слой вазелинового масла для создания анаэробных условий.

Прибор с инокулированной средой помещают в термостат при 28—30*0. Через несколько дней появляется сероводород. При добавлении к среде лимоннокислого железа она чернеет.

Материалы и оборудование. При постановке опыта: жидкая среда Вав-Дельдееа, прибор, состоящий нз склянки, резиновой пробки со стеклянной трубкой, проб» ила, в котором проис

страница 45
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(22.04.2019)