медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

Разведение 10"' 10-' 10~5 10"*

Число параллельно засеянных пробирок ... 4 4 4 4 4

Число пробирок, в которых обнаружен рост 4 4 2 1 0

Числовая характеристика будет 421; вероятное число клеток 9,5 (найдено в таблице). Для учета зароди шей на 1 г абсолютно сухой почвы полученное число делят на количество почвы, содержащейся в 1 г сырой почвы (учитывая ее влажность). При влажности почвы 25% абсолютно сухой ПОЧВУ В 1 г сырой почвы будет 0,75 Г. Найденное число клеток в 1 г абсолютно сухой почвы равно

95.1000

? G ^-12 66В. 0,75

Наличие нитрифицирующих бактерий ПЕРВОЙ фазы ОПРЕДЕЛЯЮТ ПО ОБРАЗОВАНИЮ НИТРИТОВ (РЕАКЦИЯ С ЦННК-ЙОД-КРАХМАЛОМ в КИСЛОЙ среде). Пробы берут через 7, 14 и 21 день ИНКУБАЦИИ.

Наличие денитрифицирующих бактерий и анаэробных азотфиксаторов (Clostridium pasteurianum) устанавливают на 5—6-е сутки культивирования по ПРИСУТСТВИЮ газов в ПОПЛАВКАХ.

Наличие аэробных целлюлозоразрушающих микроорганизмов ОПРЕДЕЛЯЮТ на 8—10-Й ДЕНЬ инкубации в ТЕРМОСТАТЕ ПО ОБРАЗОВАНИЮ КОЛОНИЙ и РАЗРУШЕНИЮ клетчатки на ГРАНИЦЕ между жидкой СРЕДОЙ и воздухом.

Учет микроорганизмов методами обрастания комочков почвы. При ЭТИХ методах подсчитывают комочки, образовавшие вокруг себя колонии, а затем определяют, какой процент они составляют от общего числа комочков почвы (относительная оценка плотности населения учитываемых групп микроорганизмов В почве).

Рост нитрифицирующих бактерий УСТАНАВЛИВАЮТ ПО образованию зон РАСТВОРЕНИЯ САСОЭ ИЛИ MgCOj. КРОМЕ ТОГО, из ЭТИХ ЗОН вырезают КУСОЧКИ геля и ДЕЛАЮТ ПРОБУ на NH» (РЕАКТИВ Несслера), НА нитрит (цинк-ЙОД-КРАХМАЛ в ПРИСУТСТВИИ I I?SO,) и НА нитрат (ДИФЕНИЛАМИН).

Колонии азотобактера на гелевых пластинах определяют на 3—5-е сутки инкубации по сероватым слизистым колониям, которые постепенно приобретают тем15*

157

oJl I \*~С/^ Рис. 34. Грибы, разрушающие клетчатку:

/7-"^5з5 ° — ВетаНит; б — Stackybotrns; я - Cladmporlum.

I б) Stachybotrys —- колонии черные,

У\ бархатистые, под микроскопом обна\\ руживаются спорангии, покрытые

\\ темноокрашенными спорами (рис.

V 34, б); в) Cladosporium — конидиеносцы длинные многоклеточные, отделяют неправильной формы конидии (рис.34,в). Колонии окрашены в светлый оливково-зеленый цвет; г) I'umago — колонии на клетчатке темные и состоят из скоплений (в виде узелков) темных овальных и округлых клеток; д) Chaetomium — образуют перитеции серого или зеленоватого цвета; е) аопорогеиные грибы — образуют желтый или белый мицелий, без спороноше-ния; ж) олигонитрофильные дрожжи (Lipomyces) образуют вокруг комочков почвы Слизистые молочно-белые колонии через 15—20 суток инкубации.

Материалы и оборудование. Питательные среды в колбах (МПА и КАА), жидкие среды в пробирках! среда для аэробных целлюлозо-разрушающих бактерий, среда Гвльтая, среда для анаэробных азотфнксаторов (CLOSTRIDIUM PASTEURLAMM)'; силикателевые пластины, пропитанные питательной средой для азотобактера и аэробных целлюлозоразрушаюших бактерий, стерильные чашки Петри, колбы со стерильной водопроводной водой ло 90 мл, стерильные ыоровские пипетки на 10 мл, стерильные градуированные пипетки на 1 ил, стерильные шпатели Дрнгальского, часовые стекла, стеклянные палочки с оттянутыми концами, свежие почвенные пробы (почвы разных типов), чайные ложки, пинцеты, трафареты, счетные камеры Вельфюгеля, лупы, микроскопы, предметные стекла и все необходимое для приготовления окрашенных препаратов, препаратов в раздавленной капле и для мнкроскоплроваиия,

159

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО КОЛИЧЕСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОЧВЕ МЕТОДОМ ПРЯМОГО СЧЕТА ПОД МИКРОСКОПОМ

Метод Внноградского в модификации Шульгиной.

Для более полного выявления численности микроорганизмов в почве используют и прямые методы их изучения (Виши радений, J952; Штруггер, 1949; Звягинцев, 1959).

Прямой метод подсчета бактерий в почве стал возможным после того, как Конн предложил применять для окрашивания почвенной суспензии кислые красители, хорошо прокрашивающие клетки микроорганизмов и слабо — почвенные частицы.

С. Н. Внноградский установил, что разные почвенные фракции содержат неодинаковое количество микроорганизмов. Для более точного определения их численности в почве он предложил из почвенной суспензии готовить несколько фракций. Из каждой фракции, согласно его методу, приготовляют препарат на площади 1 см2. На аналитических весах устанавливают точную массу Высушенного препарата (предварительно взвешивают на этих весах чистое стекло) и после фиксации окрашивают эритрозином в феноловой воде.

Под микроскопом подсчитывают число зародышей в поле зрения. Зная площадь и массу мазка, а также площадь поля зрения, вычисляют количество бактерий * в данной фракции почвы и в 1 г.

Исследования по методу Внноградского показали, что меньше всего микроорганизмов во фракции крупных частиц почвы и больше в самой дисперсной фракции, содержащей максимум органического вещества. Метод имеет ряд достоинств, но он очень громоздок для ш

страница 52
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(19.02.2019)