медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

МОДИФИКАЦИИ АРИСТОВСКОЙ

Т. В. Аристовская использовала метод Перфильева и Габе для изучения ценозов почвы» участвующих в разложении находящихся в ней гумусовых веществ. Стенки педоскопов покрывают питательной средой, содержащей фракцию гумуса. В качестве питательного субстрата применяют органо-минеральные комплексы гумуса, свойственные исследуемому типу почв.

50 г почвы заливают 1 л 0,1 и. раствора NaOH и через 18—20 ч отфильтровывают, рН фильтрата осторожно доводят 0,2 н. НО до 5. Затем в него по каплям прибавляют 20%-иый раствор FeCls до полного выпадения гумусовых веществ в форме геля, который отфильтровывают и отмывают от следов хлора (проба с 1%-ным раствором AgNOa с добавлением азотной кислоты).

Около 5 мл геля растирают в ступке, взбалтывают

в 1 л. воды, вносят 0,1 %-ный раствор агара и стерилизуют.

Для покрытия стенок капилляров средой педоскоп боковой стороной помещают в чашку Петри с агаризо- . ванным расплавленным субстратом, который заполняет отверстия капилляров. Затем поверхность педоскопа ; тщательно протирают стерильной ватой, можно подсушить его со средой; она покроет только стенки капилляров. Следует тщательно следить, чтобы среда не образовала в каналах капилляров перемычек, которые будут мешать циркуляции по капиллярам почвенного раствора и затруднят окрашивание микроорганизмов.

4. ВЫЯВЛЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ АВТОХТОННОЙ ГРУППЫ, УЧАСТВУЮЩЕЙ В РАЗЛОЖЕНИИ ГУМУСОВЫХ ВЕЩЕСТВ, ПО МЕТОДУ ВИНОГРАДСКОГО В МОДИФИКАЦИИ ТЕППЕР

Для выявления автохтонной (местной) группы микробов С. Н. Виногра'дский рекомендует отмытые от следов хлора (реакция с AgN03 с последующим добавлением азотной кислоты) и прокипяченные гелевые пластины пропитать минеральной средой без источников углерода и азота (в г на 200 мл дистиллированной воды). •

164

КгНРО< 1,0 FeSO, . 0,01

MeSO, 0,5 Mn2 (SO-) s 0,01

NaCl 0,5

В чашку вносят 3—5 мл среды и добавляют гуматы кальция. После упаривания среды (при температуре 40—50X1 до образования эмалевой поверхности По ней раскладывают 40—50 комочков почвы или перед упариванием добавляют почвенную суспензию.

Исследования Е. 3. Теппер* показали, что вместо Са-гуматов лучше использовать Na-гуматы (8—10 мг на чашку).

Более крупные колонии микроорганизмов получают, если гуматы используют только как источник углерода. В этом случае в минеральную среду вносят еще азот в виде KNOs (14 мг на чашку). Гелевые пластины с гуматами помещают во влажную камеру и выдерживают при 25—28°С 40—50 дней и больше Вокруг комочков почвы на гуматах появляются специфичные бурые колонии, диффундирующие в гель, или колонии в виде тонких бархатистых налетов розового или белого цвета (колонии Bactoderma alba и Bactoderrna rosea).

Исследования показали, что часть бурых колонии состоит из нокардий (проактиномицетов) и микобакте-рий. Часть бурых колоний образует микромоноспоры и артробактер. Эти микроорганизмы можно затем выделить на нитритном агаре,

$. ВЫЯВЛЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ, УЧАСТВУЮЩИХ В РАЗЛОЖЕНИИ ГУМУСОВЫХ ВЕЩЕСТВ,

по МЕТОДУ ТЕППЕР

Чтобы установить, какие микроорганизмы в данной почве реагируют на отдельные фракции гумуса, нужно из средней пробы взять навеску почвы в 25 г и поместить на гелевые пластины, пропитанные минеральной средой Виноградского без источников углерода и азота. Почву смачивают до полного насыщения слабым раствором Na-гумата (или другой фракцией гумусовых веществ), содержащего примерно 0,5 мг'углерода в 1 мл гумата. Часть гуматов при этом проникает в гель.

•Теппер Е. 3. Микробиология, т. 32, вып. 4.

167

Чашки помещают во влажную камеру и выдерживают при температуре 25 28°С 50—60 суток и более. Если в почве находится специфичная микрофлора, разлагающая гуматы, она начинает развиваться и образует бурые колонии на поверхности комочков почвы или колонии в виде тонких бархатистых налетов. Иногда бурые колонии диффундируют также в гель.

Выделить чистую культуру из бурых колоний и колоний в виде налетов на бедной среде (лучше на нит-ритном агаре).

Глава XII

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЧВЫ

1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЧВЫ ПО ИНТЕНСИВНОСТИ РАЗЛОЖЕНИЯ ПОЛОТНА (МЕТОД МИШУСГИНА, ВОСГРОВА И ПЕТРОВОЙ)

Чем выше в почве содержание подвижного азота и других элементов питания, тем активнее в ней происходят процессы окисления клетчатки.

Так как целлюлозоразрушающие .микроорганизмы, разлагая клетчатку, синтезируют и частично выделяют в среду аминокислоты, при обработке остатков полуразрушенного полотна 0,5%-ным раствором нингидри-на а тех местах, в которых активно развивались микробы и разлагалась клетчатка, на полотне образуются сиреневые пятна (реакция аминокислоты с нингидри-ном).

При постановке опыта обшивают льняным полотном хорошо отмытые стекла (10X50), стерильной лопатой и стерильным ножом делают почвенный разрез на глубине 35 см, К ровной стенке разреза по профилю прикладывают стекло с полотном, с противоположной стороны стекло засыпают почвой, плотно прижимая к стенке. Полотно закл

страница 55
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(25.04.2019)