медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

адывают, отступя от поверхности почвы на 2—3 см. В том месте, где помещают полотно, ставят этикетку.

После экспозиции в течение 20—30 дней стекло откапывают от стенки, подсушивают полотно и осторожно стряхивают с него почвенные частицы. Для выявле168

ния аминокислот полотно обрабатывают 0,5%-ным раствором нингидрнна в ацетоне.

Для выражения степени разложения полотна в процентах вырезают определенную его площадь на глубину горизонта (анализ проводят по горизонтам), промывают остаток полотна водой, высушивают и взвешивают. Такую же площадь вырезают с полотна, которое служит контролем. Затем определяют степень разложения полотна.

Метод широко используют в агрономической практике для оценки микробиологической активности почвы.

%. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЧВЫ ПО ВЫДЕЛЕНИЮ УГЛЕКИСЛОГО ГАЗА

В почве без корней растений источником образования С02, являются микроорганизмы, выделяющие его при дыхании. Этот углекислый газ определяют, улавливая баритом или в аппарате Варбурга.

В первом случае 150—200 г почвы, просеянной через сито с ячейками 2 мм, помещают в стерильную склянку Тищенко емкостью 500—600 мл с двумя отводными трубками. Влажность почвы стерильной водой доводят до 60% общей влагоемкости. Воздух, предварительно очищенный от углекислого газа (протягиванием через две последовательно соединенные склянки Тищенко, содержащие 30%-ный раствор едкого натра и стерильную воду, предназначенную для увлажнения почвы), пропускают через почву по нижнему отверстию склянки. Прошедший сквозь почву воздух выходит через выходную трубу в последовательно соединенные две склянки Дрекселя на 250—300 мл, содержащие по 100 мл 0,1 н. раствора Ва(ОН)2 с индикатором фенолфталеином (выходная трубка склянки Тищенко с почвой соединена резиновой трубкой с тубусом склянки Дрекселя).

Через установку во время опыта воздух продувают со скоростью I—2 л в 1 ч при помощи аспиратора или водоструйного насоса.

После окончания опыта или по мере нейтрализации барита углекислым газом, определяют (титрованием 0,1 н, щавелевой кислотой) не использованный в реакции Ва (ОН)j. По его расходу и устанавливают количество выделившегося СОг, используя уравнение:

В а (ОН) 2+COs=В aCOs + Н20.

Для каждого почвенного образца параллельно определяют содержание углекислого газа в двух пробах. Пропускают воздух 10—12 дней.

. Количество выделяемого углекислого газа за определенный промежуток времени пересчитывают на 1 г абсолютно сухой почвы или на 1 г гумуса.

3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АММОНИФИЦИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ

100 г свежей почвы, просеянной через стерильное сито с ячейками 2 мм, помещают в стерильные эрлеи-мейеровские колбы емкостью 250 мл. К почве добавляют субстрат для аммонификации (1% кровяной муки, содержащей 11,5% азота, или 1% пептона, или 1— 2% гороховой муки).

Влажность почвы доводят до 50—60% общей влаго-емкости. Колбы закрывают ватными пробками и ставят в термостат при 28—30"С. Через 7 дней компостирования почвы опытных вариантов и контрольную почву подвергают анализу.

Для этого из тщательно перемешанной почвы берут навеску в 3—5 г, помещают ее в эрленмейеровскую колбу на 250 мл и добавляют 100 мл 1 и. раствора КО или же NaCl и фильтруют через бумажный фильтр. Промывку почвы 1 н. раствором КО продолжают до полного исчезновения аммиака (проба с реактивом Несслера). Почвенную вытяжку в 1 н. растворе КО доводят до определенного объема, затем из нее берут 50 мл. Аммиак отгоняют, используя отгонный аппарат для определения азота по микрометоду Кьельдаля. Конденсированная вода с аммиаком из холодильника поступает в колбу с титрованным 0,1 н. раствором HjSO« с индикатором. Остаток кислоты титруют 0,1 н. щелочью в присутствии метилового красного. 1 мл 0,1 н. серной кислоты, нейтрализованной аммиаком, соответствует 1,7 мг аммиака или 1,4 мг азота.

Очень хорошие результаты дает определение аммиака в чашках Конвеи (рис. 36). Эти чашки состоят из двух цилиндров, имеющих общее дно. Чашку "плотно

170 ' закрывают хорошо пришли- . J с»

фованной к верхнему краю внешнего цилиндра стеклянной крышкой, которую для лучшей герметичности смазывают смесью воска и вазелина. 1 мл титрованного раствора 0,1 н, HjSO« вносят во внутреннюю часть чашки и приливают 1—2 капли индикатора (метиловый красный). Держа чашку наклонно, во внешнюю часть наливают 1—2 мл исследуемого раствора. Затем чашки ставят горизонтально и, держа левой рукой наготове крышку, помещают в противоположный конец внешней части 1 мл насыщенного раствора углекислого калия (можно заменить 10%-мым раствором едкого кали). Потом быстро закрывают чашку крышкой и вращательным движением перемешивают содержимое внешней части чашки. Контролем служит «слепая проба». Вместо исследуемого раствора берут дистиллированную воду. Заготовленные чашки (в нескольких гювторностях) оставляют на сутки при комнатной температуре или на несколько часов ставят в термостат с, температурой 35—37°С. 'После этого крышку снимают и титруют 0,02 н, -или более слабым раствором щелочи до изменения окрас

страница 56
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(22.04.2019)