медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

ез которую впоследствии берут газовые пробы инсулино-вым шприцем для анализа на газовом хроматографе. В конце опыта реакцию восстановления С2Н2 прекращают, добавляя к культуральной среде 0,2 мл 40%-ного NaOH. Газовую смесь готовят в газовых смесителях заранее (за 24 ч), чтобы .обеспечить иаиболее полную диффузию газовых составляющих.

Ацетилен и этилен определяют на газовом хроматографе с пламенным ионизационным детектором* по времени выхода каждого газа, сравнивая его временем выхода известного стандартного газа. Колонку (1,5 м длиной и 4 мм в диаметре) заполняют сорбентом (силикагелем АС К). В качестве газа-носителя исноль-зуют водород, расход которого устанавливают равным 36 мл за 1 мин (хроматограф « Becker Delft*). Температура колони 50°С, объем вводимой газовой пробы 0,5 мл. Количество С2112 и С21Ц рассчитывают по калибровочной кривой.

Поскольку в длительных экспериментах, работая со шприцами, трудно обеспечить их полную герметичность, для определения азотфиксирующей активности почвы, удобнее пользоваться флакончиками из-под пенициллина или стеклянными сосудиками (16 см8) с силиконовой пробкой сверху и боковым отростком, перекрывающимся притертым стеклянным затвором**. В последнем случае через боковой отросток легко осуществляется эвакуация и наполнение сосуда необходимым инертным газом.

Глава XIV ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЯ КОРНЕВОЙ ЗОНЫ РАСТЕНИЙ И НА КОРНЯХ

Чем ближе почва расположена к корневой системе растений, тем больше бактерий в ней содержится. Особенно много их на поверхности корня.

К корневой системе растений бактерий привлекают питательные вещества. В почве, непосредственно при* Определение этилена и ацетилена можно проводить, используя другие детекторы и хроматографы, в частное™, приборы ХГ 1302 (СССР) я «Varlan-Aerograpb модель 1868 (США).

«•Федорова Р. И, Мнлехииа Е. И., Ильюхниа Н. И, Бражников В. В, «Известия АН СССР, сер. биологическая», 1873, № 1, С 106-113.

176

12 ТАЛЕР В, В,

177

легающей к корням, получившей название ризосферы, дополнительным источником питания служат в основном отмирающие клетки эпидермиса и корневые волоски. Питательными веществами для бактерий, развивающихся иа корнях, являются продукты экзоосмоса растений (корневые выделения),

В ризосфере развиваются те же формы бактерий, что и в почве, отдаленной от корней. Как правило, иа корнях преобладают неспороносные палочки рода Pseudomonas и мнкобактерии. При этом на корнях злаковых, бобовых и других растений часто поселяются разные виды и разновидности. Это объясняется неодинаковым обменом веществ у разных растений.

Бактерии в корневой зоне растений, используя корневые выделении, в известной мере играют роль саьк-таров, очищая зону корня от продуктов метаболизма растений. Минерализуя органические остатки, они в то же время переводят ряд элементов питания в доступную для растений форму. Отдельные виды бактерий, развивающиеся' на корнях, продуцируя ростовые вещества и витамины, могут оказать положительное влияние на рост растений. Однако необходимо отметить, что многие бактерии, развивающиеся в корневой зоне и на. корнях, обладают денитрифицирующей способностью и в определенных условиях могут вызвать большие потери азота из почвы,

1. УЧЕТ БАКТЕРИЯ Б РИЗОСФЕРЕ МЕТОДОМ КРАСИЛЬНИНОВА

Стерильной лопатой подкапывают почву под растениями, стерильным пинцетом извлекают корни. Приставшую к корням почву стряхивают в стерильную чашку Петри, тщательно перемешивают и из нее берут навеску в 1 г (одновременно берут навеску почвы для определения влажности). Навеску помещают в 100 мл ильной водопроводной воды и готовят ряд разведеПри поверхностном посеве из полученных разведений стерильной микропипеткой наносят 0,05 мл на поверхность питательных пластин (МПА, крахмал о-амми-ачный агар и др.) и шпателем досуха втирают в агар. При глубинном посеве из разведений стерильной пипеткой берут 1 мл суспензии и вносят в стерильную

17В чашку Петри, а затем в чашку добавляют соответствующую агарнзованную питательную среду.

Выросшие на агаре колонии подсчитывают визуально и под луной. Для определения числа зародышей в 1 г почвы при глубинном посеве количество выросших на чашке колоний умножают на соответствующее разбавление и делят на массу абсолютно сухой почвы, содержащейся в I г сырой почвы. При поверхностном посеве (чтобы установить число зародышей в 1 мл) количество колоний на чашке еще умножают на 20.

Для определения качественного состава бактерий колонии на чашке группируют по культуралыгым признакам. Из каждой группы готовят препарат и выявляют форму бактерий. Для установления видовой"принадлежности из колонии делают пересев на скошенный агар и после очистки культуры изучают ее морфологические и физиологические признаки.

Z УЧЕТ РИЗОСФЕРНОЙ И КОРНЕВОЙ МИКРОФЛОРЫ МЕТОДОМ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНЫХ ОТМЫВАНИЙ КОРНЕЙ ПО 1. 3. ТЕППЕР

Из выкопанных монолитов почвы с растениями стерильными пинцетом и ножницами отбирают 1 г молодых корней (примерно одного диаметра) с приставшими к ним частицами почвы (одновременно берут навеску поч

страница 59
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(23.02.2019)