медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

зуются зоны растворения мела (рис. 37).

Подсчет колоний молочнокислых бактерий на сусло-агаре с мелом и капустном агаре с мелом проводят на 8—6-й день, а на капустном агаре со спиртом и мелом—

196

на 7—10-й день. Среда 2 необходима для выявления молочнокислых бактерий в составе эпифитной микрофлоры исходной растительной массы, так как спирт тормозит рост посторонней микрофлоры. Количество посторонней микрофлоры (аэробных гнилостных микроорганизмов) определяют глубинным посевом на пептон ном агаре (среда 3). Подсчет колоний ведется иа 5— 7-й день.

Количество микроскопических грибов и дрожжей определяется на сусло-агаре со стрептомицином (среда 4) поверхностным посевом. Подсчет колоний ведется на 3—4-й день (при необходимости повторно на 7—8-й день).

Титр маслянокислых бактерий устанавливают на жидкой среде Емцева (среда 5а) и картофельной среде (среда 5). Для определения количества спор мясляио-кислых бактерий ведется посев из суспензии, после пастеризации в течение 10 мии при 75°С. Учет результатов анализа ведется по интенсивности выделения газа (кусочки картофеля всплывают на поверхность жидкости), и титр маслянокислых бактерий и их спор устанавливают методом предельных разведений по Мак-Креди.

Аэробные протеолитические бактерии учитывают на мясо-пептонном бульоне (среда 6) по накоплению газа в поплавках. Посевы выдерживают при 28еС в течение двух недель.

При анализе силосов из трав, выращенных по фону высоких доз азотных удобрений, проводится также учет денитрифицирующих бактерий иа среде Гильтая (среда 7). Посевы выдерживают в течение 10—12 дней при 28°С. Подсчет деиитрификаторов ведется по интенсивности выделения газа и изменению цвета индикатора.

При анализе силоса ведется также учет спор аэробных гнилостных бацилл. На плотной среде (среда 8)

197 делают поверхностный посев. Чашки инкубируют при 28Т, подсчет колоний проводят на 4-й день.

Бактерии группы кишечной иалочкн учитывают на среде Кесслера иле Булира по выделению газа и накоплению его в поплавках. Пробирки выдерживают 48 ч при 40—42°С.

Состав

Среда 1, Сусло-агар с мелом. Сусло, разбавленное до 3% по Баллингу,— I Л, агар —20—25 г, стерильный мел —30 г. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.

30 мин.

Среда 1а, Капустный агар с ЖТОШ. Капустный бульон — 900 мл, дрожжевой экстракт—100 мл, пептон—10 г, глюкоза-20 г, ацетат натрия —3,35 г, марганец сернокислый —0,025 г, агар — 15—20 г.

Стерильный мел добавляют в колбы иа расчета 5 г на 200 ил ы. Стерилиз>

среды. Стерилизуют при 0,5 атм в

Среда 2. Капустный агар со спиртом и мелом. В расплавленную

к охлажденную до Б0*С среду прибавляют 20 мл этилового спирта (96%-ного) на 300 ил среды, тщательно взбалтывают и заливают и чашки Петри с посевным материалом.

Среда!. Псптонный агар. . Пептон —5 г, К»НРО» — 1 г, КН2Р04— 0,5 г, MgSO. — 0,5 г, NaCl — следы, водопроводная вода— 1 .л, агар, хорошо промытый, — 15—Я) г. Стерилизуют при 1 атм в течение 20 мин.

Среда 4. Сусло-агар со стрептомицином. Сусло, разбавленное до 3% ю Баллингу, 1 л, агар — 25 г. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин. Перед разливкой среди в чашки Петри в сусло-агао добавляют 80—100 ед. стрептомицина на каждый миллилитр среди.

Среда. 4а. Подкисленные сусло-агар. Сусло, разбавленное до 3% по Баллингу, — 1 л, агар — 20—25 г. Стерилизуют при 0,5 атм в

течение 30 мин. Перед, разливом среды ? чашки Петри в расплав. ленный сусло агар добавляют 2 ил молочной кислоты (на 1 л среды), прокипяченной в течение 10 мин иа водяной бане.

Среда §, Картофельная среде с мелом. В пробирки вносят стерильный мел (иа кончике скальпеля),"8—10 картофельных кубиков величине* 2—3 мм заливает водопроводной водой до % объема пробирок. Стерилизуют яри 1 атм в течение 30 иин.

Среда ба. Картофельный крахмал — 20 г, пептон — 5 г, дрожжевой автолкздт — 0,2 мг/n, КНгРО« —0,5 r, KiHPO, — 0,5 г, MrSO, — 0,5 г, NaCl — 0,5 г, FcSO, — 0,01 г, Мл SO, — 0,01 г, СаССу-'10 г, смесь микроэлементов no М. В. Федорову— 1 мл, дистиллированная вода —1 л, тмогликолевая кислота —0,05%, иейтральрот — 0,004%, рН 7,4—7,5. Стерилизации среды осуществляется при 0,6 атм в течение 30 мин. Температура инкубации посевов 30—35* С

Среда в. Мясо-пептонный бульон. Пептон —10 г, NaCl — 4 г, мясной бульон—1 л. Наливают в пробирки с поплавками до % объема. Стерилизуют при 1 атм в течение 20 мин.

Среда 7, Среда Гнльтая (видоизмененная). Лимоннокислые натрий—2 г, KNO, — 1 г, КН,РО,—1 г, KiHPO,—1 г, MgSO,— 1 г, CaClj — 0,2 г. Fed, —следы, дистиллированная вода— I л,

1%-йый раствор брвитимешбдау (рН -6,8—7,0). Стерилизуют при

1 атм в течение 20 мин.

Среда 8. Мясо-пептонный ягар я сусло-агар 1 ! 1. Стерилизуют

при. 0,5 атм в теченье 30 мнн.

Среда В. Среда Кесслера. К 1 л водопроводной воды прибавляют 50 мл свежей бычьей желчи и 10 г'пептона. Смесь кипятят 15 мин на водяной бане, взбалтывают Когда пептон растворится, фильтруют через вату, затем прибавляют 10 г лактозы. После растворения лактозы устанавливают слабощелочную реакцию

страница 67
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(26.04.2019)