медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

уды и других внешних источников. В вымя животного микробы проникают через каналы сосков, и хотя там они подвергаются бактерицидному действию ткани вымени, но наиболее стойкая часть микробов (микрококки, стрептококки) i приживается в нем. При несоблюдении правил гигиены ;> источником загрязнения молока бактериями могут быть руки и одежда доилыцика, а при стойловом содержании скота молоко обсеменяется микрофлорой желудочно-. кишечного тракта (кишечной палочкой и маслянокис-лыми бактериями).

В молоке, получаемом при соблюдении санитарных правил, преобладают микрококки, молочнокислые стрептококки (кишечного происхождения), сарцины.

Загрязненное молоко содержит значительное количество бактерий группы кишечной палочки, маслянокислых и гнилостных бактерий.

Во время хранения молока изменяется количество содержащихся в нем бактерий и соотношение между отдельными видами. Характер этих изменений зависит

от температуры, продолжительности хранения и исходного состава микрофлоры.

Отбор пробы молока проводят после тщательного его перемешивания. Стерильным черпаком отбирают 50 мл молока в стерильную посуду, закрывают стерильной ватной пробкой и немедленно приступают к анализу.

При микробиологическом анализе молока определяют общую численность бактерий, учитываемых на агаре с гндролизованным молоком, на мясо-пептонном агаре, титр кишечной палочки (coli-титр) и проводят пробу на редуктазу.

Проба иа редуктазу. В молоке содержатся различные ферменты, в том числе редуктаза (анаэробная дс-гидрогеназа, передающая отнятый водород от окисляемого субстрата любому ненасыщенному соединению, но неспособная передать его кислороду воздуха). Редуктаза накапливается в молоке главным образом при размножении в нем микроорганизмов.

В присутствии фермента редуктазы молоко, окрашенное метиленовой синью, обесцвечивается, так как редуктаза восстанавливает метнленовую синь, переводя ее в бесцветную лейкоформу. Свежевыдоенное молоко восстанавливает метнленовую синь медленно. С увеличением числа бактерий в молоке скорость восстановления метиленовой сини возрастает. На скорости восстановления в молоке метиленовой сини и основано примерное определение в нем численности бактерии и степени свежести молока — его качества. Однако строгой зависимости между числом бактерий и временем обесцвечивания в нем метиленовой сини нет, так как разные виды бактерий выделяют неодинаковое количество редуктазы.

Проба на редуктазу проводится следующим образом. В чистую высокую пробирку наливают 1 мл раствора метиленовой сини (5 мл насыщенного спиртового раствора метиленовой сини иа 195 мл дистиллированной воды) и 20 мл исследуемого молока, предварительно нагретого до 38—40°С. После перемешивания пробирку ставят в редуктазник или термостат при 38—40° С. (указанная температура является оптимальной для фермента редуктазы) и наблюдают за обесцвечиванием через 20 мин, 2 ч и 5,5 ч. Проба на редуктазу считается законченной, когда наступает полное обес204

205

цвечиванне молока. По времени обесцвечивания молоко разделяют на четыре класса (табл. 3).

Определение общего количества бактерии в молоке. Вначале готовят разведения {10-»—Ю-6), для чего из отобранной пробы стерильной пинеткой берут 1 мл молока и переносят в пробирку, содержащую 9 мл стерильной водопроводной воды; пипетку неоднократно споласкивают водой, находящейся в пробирке, и больше не используют. Пробирку взбалтывают 1 мин и таким образом получают разведение 10"1. Затем готовят последующие разведения. При обесцвечивании молока до 20 мин делают глубинный посев из разведений Ю-4, lfj~5 „ м-*. для этого берут отдельной стерильной пипеткой но 1 мл суспензии и вносят в стерильные чашки Петри (в двух- или трехкратной повторности). При обесцвечивании молока после 20 минут посев делают из разведений ICM, 10~«, 10"5. В чашки с суспензией вносят расплавленный и охлажденный до 45—50°С мясо-пептонный агар. После перемешивания суспензии с агаром чашки Петри с посевом помещают в термостат при 28—зо°С. После трехдневной инкубации проводят подсчет колоний бактерий в чашках. Количество дрожжей и плесеней подсчитывают на 4-й день. Число колоний умножают на степень разведения и выводят среднее арифметическое из трех чашек. Таким образом определяют численность бактерий в 1 мл молока.

Определение титра кишечной палочки (СоН-титр). Важное значение при оценке молока имеет определение титра кишечной палочки. Наличие в молоке бактерий группы кишечной палочки указывает иа фекальное загрязнение (.кишечная палочка — обитатель кишечника человека и животных), вместе с которым в молоко могут попадать микроорганизмы, патогенные для человека. Кроме того, бактерии группы кишечной палочки приводят к пороку сыра при переработке молока в сыр: вызывают вспучивание сыра на первых этапах его созревания. Титром кишечной палочки (или Coli-титром) называется наименьшее количество исследуемого материала, выраженное в миллилитрах или граммах, в котором обнаружена кишечная палочка. Для выявления кишечной палочки и определения е

страница 70
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(16.02.2019)