медицинский каталог




Практикум по микробиологии

Автор Е.3.Теппер, В.К.Шильникова, Г.И.Переверзева

хранении— в картонные коробки.

При выращивании микроорганизмов в колбах используют только жидкие питательные среды. Для культивирования аэробных микроорганизмов среду наливают тонким слоем (например, 30 мл в колбы Эрлевмейе-ра на 100 мл), для выращивания анаэробных микроорганизмов колбу заполняют на %.

В чашках Петри (двойные чашки) микроорганизмы культивируют лишь на плотных средах. Эти чашки имеют высоту ~ 1,5 см, диаметр ~8—10 см (диаметр крышки несколько больше, чем диаметр нижней чашки).

Для работы с микроорганизмами используют специальные бактериологические иглы, петли и шпатели (рис. 2). Их изготовляют из платиновой проволоки, которую закрепляют в специальных металлических держателях или впаивают в стеклянные палочки. Толщина игл и петель не должна превышать 0,5 мм, шпателя — 1,5 мм и более. При посевах (и пересевах) культур микроорганизмов из колоний, выросших на плотных средах, применяются иглы или шпатели. Последние используют для взятия клеток микроорганизмов из колоний, врастающих в субстрат. Суспензии микроорганизмов берут петлей.

рис. 2. Бактериологическая игЛА (А), шпатель (б), КЕГЛИ, еде-правилыю (в) и неправильно (г).

При приготовлении препаратов микроорганизмов предметные стекла удерживают на весу пинцетами Корнэ или специальными пинцетами-держателями. Сушить препараты целесообразно на верхнем ярусе сушильного металлического столика КОХА. Промывать их удобно на приспособлениях — перекладинах или на так называемых препаратодержателях — параллельно рас-положенных стеклянных палочках, соединенных резиновыми трубками' (длина палочек 20—30 см, трубок 15---20 см). Палочки устанавливают над фарфоровыми чашками или ваннами.

Техника посева. Посев (ИЛИ пересев) всегда проводят вблизи горелки. При посеве клеток микроорганизМОВ ИЗ пробирки В пробирку обе пробирки (одну с культурой, другую со стерильной питательной средой) берут в левую руку. Одну пробирку зажимают между указательным и' средним пальцем (первая пробирка). Нижний КОНЕЦ ее свободно лежит на большом пальце (с его левой стороны; со стороны сочленения с указательным). Другую пробирку зажимают между средним и безымянным пальцами (вторая пробирка). Она должна лежать, параллельно первой. Ее нижний конец располагается с правой стороны большого пальца. БольШОЙ палец, находясь между пробирками, должен быть в естественном, ненапряженном состоянии; он слегка удерживает пробирки В параллельном по отношению Друг К другу положении.

Пробирки при взятии мазка необходимо удержать В наклонном положении, чтобы гарантировать стерильность культуры. Если их держать вертикально, то ВОЗможно попадание посторонних клеток микроорганизмов. . В пламени горелки тщательно обжигают" бактериологическую иглу (петлю), держа ее в правой руке в отвесном положении. Мизинцем правой руки вынимают из второй пробирки ватную пробку и зажимают ее МЕЖду мизинцем И ладонью, пробку первой пробирки зажимают между безымянным и средним пальцами правой руки. Снова слегка обжигают иглу и вводят ее в пробирку с культурой. Платиновая игла остывает очень быстро. Легким прикосновением ее к колонии микроорганизмов берут небольшое количество микробной МАССЫ и переносят во вторую пробирку.

Если высевают в плотную скошенную среду, иглой с культурой проводят прямую или волнообразную черту по поверхности среды легким движением (не разрезая среды)—посев штрихом. Если высевают 'в столбик питательной среды, иглу вводят в центральную часть в толщу ее — посев уколом. Если посев делают в жидкую среду (или из жидкой среды), наклонять пробирки следует слегка,, чтобы не смочить пробку и края пробирки.

Пробки перед тем, как ими закрыть пробирки, обжигают в пламени. Удобнее сначала закрыть первую пробирку, потом вторую.

ГлВ М

МЕТОДЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ МИКРООРГАНИЗМОВ

Техника взятия культуры для приготовления препарата. Обожженной в пламени бактериологической иглой из пробирки с культурой, держа ее в левой руке почти в горизонтальном положении вблизи горелки, берут небольшое количество микробной массы. Перед взятием-культуры правой рукой вынимают ватную пробку из пробирки, зажимая ее между мизинцем и ладонью, а края пробирки обжигают на пламени горелки. Иглу следует держать в правой руке большим, указательным и средним пальцами.

При взятии культуры пробирку необходимо удерживать в наклонном положении. Если культуру берут из жидкой среды, не следует сильно наклонять пробирку, чтобы не смочить ее края и пробку, и лучше пользоваться" петле!. После взятия культуры края пробирки и пробку обжигают в пламени и закрывают пробирку.

Исследование живых клеток микроорганизмов методами «раздавленной» и «висячей» капли. В обоих случаях возможно окрашивание объекта «прижизненными» красителями — «витальная» окраска. В качестве прижизненных красителей можно использовать метиле-новый синий, нейтральный красный в концентрациях от 0,001 до 0,0001%.

Оба метода применяются для выявления подвижности клеток микроорганизмов, наблюдений за размножением, образованием и прорастанием спор, для установл

страница 8
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74

Скачать книгу "Практикум по микробиологии" (2.95Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(16.02.2019)